要了解在刚切开西瓜的安全隔夜冷库的作用，本研究采用国家GB 4789.2-2016测试方法在福州销售的三种不同品种的西瓜鲜切片，切片在夜间冷切，表面在表面下方2厘米处切割冷。析样品中的菌落总数。果表明，出现了在鲜切面条的相同品种西瓜菌落总数之间没有差异显著，杯子过夜和2厘米的表面下冷藏夜后切面。此同时，根据rRNA基因的序列分析的方法细菌16S中的三个不同品种西瓜切割表面的板的形态不同的细菌菌落analysées.Les结果表明不同的形态的细菌菌落属于葡萄球菌属，芽孢杆菌属，肠杆菌属肠杆菌属，埃希氏菌属和欧文氏五种，主要存在于空气和地，并且是致病性的菌株。此，新鲜切割的西瓜在一夜冷却后不会由于细菌繁殖而造成食品安全问题。键词：冷藏室夜间冷藏;鲜切西瓜;食用安全性CLC号码：R 155.5 + 4文档代码：A文章编号：1008-0384（2018）08-865-05Résumé：冷冻西瓜片的安全过夜上样品表面板的总数量新切的，新鲜切割面存储在冰箱中过夜后和2厘米新切割表面下方的冷却三个品种福州出售已在结果确定西瓜过夜后没有表现出差异显著同一品种的样品：从样品中分离的微生物的16S rRNA的基因序列表示，它主要是葡萄球菌属，芽孢杆菌属，肠杆菌属，埃希氏菌属和欧文氏菌。们中的大多数通常存在于空气和土壤中，不会造成健康问题，制冷过夜后，刚剪西瓜应该是健康安全的。键字勒松西瓜属于葫芦科属，一个常见的水果，其冷却在夏季。夏季，大多数消费者都用塑料薄膜覆盖的西瓜的其余部分，并置于冰箱中备用层（4℃）以使其冷却。而，在2014年，该消息“西瓜一夜之间被枪杀在一个三口之家，经验表明，在数十亿美元计算的西瓜夜晚细菌的数量，”和真相报告中财务央视节目“第一时间”表明，西瓜的菌落总数超标，不能继续食用。论作为普通消费者缺乏常识微生物学基础，很难区分和判断理性上述报告，并很容易让普通消费者拥有的想法，西瓜隔夜不超过殖民地总数因为超过了常数。着生活水平的提高，消费者越来越重视粮食安全。
　　于西瓜的在夜间的安全性，在之前的两个故事，但在夜间西瓜的菌落总数已经过测试，细菌种类和致病性西瓜菌落总数有一夜没有分析，检测本身也进行了。不存在的科学实验设计和标准测试方法，结果是难以客观和准确评估每日西瓜消费[1-2]的安全性。此，本研究采用国家标准GB的4789.2-2016方法“确定食品微生物学检验菌落总数” [3]，三种不同品种的西瓜在福州出售的新鲜切割表面，分析在夜间冷冻面和在夜间冷表面2以cm表示的样品中菌落的总数后的冷表面中冷却后，露出西瓜片的菌落总数的趋势晚上，如果超过过夜冷却后西瓜切片的菌落总数。

　　时，使用分析基于细菌的16S rRNA基因序列的方法[4-5]。序和在三个不同品种西瓜片的斑块不同的形态的细菌的同源性分析进行制成，并且所述类型和不同形态的细菌致病性菌落的总数的斑块西瓜的确定是初步的。研究成果将提供一个基准，以有效地对网络舆论隔夜粮食安全西瓜的合理评估响应隔夜西瓜上引导消费者。料和方法材料试验样品的来源有三种不同品种的西瓜样品，麒麟瓜，黑美人，黑富士的。集在大型超市和农贸市场福州8 - 9月2017试剂和仪器琼脂培养基（PCA）（北京路桥技术有限公司），DL2000标记的dNTP，冷库工程防爆Taq DNA聚合酶（宝） ，琼脂糖（Biowest，西班牙），凝胶回收试剂盒从琼脂糖（上海）生物技术），PCR仪（BIO-RADTM PTC 200），凝胶成像系统（Bio-Gel Doc凝胶XR RADTM +）仪器电泳与食品（北京六一仪器厂）。试方法抽样及处理方法按照GB / T规定的方法4789.1-2016“食品卫生检验的一般规则，”三种甜瓜西瓜样本的麒麟，中收集了大型超市和福州农贸市场的黑美人和富士黑。其放入无菌拉链袋中，放入装有冰块的冰箱中，然后运送到实验室使用。断面西瓜菌落的总数是由“在食品微生物测试菌落总数的测定”在GB 4789.2-2016规定的方法，和三个的新切割表面来确定不同品种西瓜，冷冻过夜切断面和2厘米表面切割表面下面冷藏过夜后。析了菌落总数。了模拟家庭西瓜的消费模式，三种不同品种的西瓜切成实验室的室内环境，并放置在超洁净无菌工作台用于分析西瓜菌落片的总数。析了三种不同品种西瓜新鲜切面条的总数。西瓜冷却过夜后分析小关节的总数。析了菌落总数。落总数。上形态细菌不同菌落16S rRNA序列分析。鲜切割的三个不同品种西瓜片，冷冻切片过夜，并冷冻过夜切片分析总菌落的分析计数琼脂培养基（PCA）上。签充电在平板上的菌落的总数，并转移至5ml的LBliquide.Après的在37℃下已被纯化，并用在200转/ min-1的DNA的受控温度下搅拌摇动提取细菌菌落以扩增16S rRNA。克隆和测序分析。拌均匀，煮沸在100℃下10分钟，在12 000转/分钟离心5分钟，吸液管小心地将上清液并放在一边。
　　增以下循环条件下进行：94℃，3分钟，94℃，30秒，55个S，55秒，30秒，72℃，2分钟，30个循环，72℃， 10分钟。
　　反应完成后，5.0 PCR产物的微升从琼脂糖1％凝胶收集并在5 V·厘米-1电泳30分钟，然后拍照和其他人储存在4°C下使用。起LB培养基上的白色菌落。落PCR使用上游和下游通用M13引物进行，并在1％琼脂糖凝胶电泳正克隆，然后发送到上海生工生物科技有限公司用于两个方向的测序和剪接。理，并从不同品种西瓜，在2厘米冷库和过夜储存后的切断面下面的细菌菌落数的新切割表面数据的分析，使用SPSS统计分析软件单因素方差分析（ANOVA）为15.0，显着性水平设为α= 0.05。
　　过测序所得到的细菌菌落的16S rRNA的完整序列已经被对准冲击（https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/），得到具有最高相似性的每个序列中的序列。
　　用MEGA 4.0软件[7]制备的取向系统发育，并已通过执行重复操作1000获得的系统发生树的支持速率。
　　果和菌落在西瓜的试验结果的总数的分析（图1），三个不同品种西瓜切开的新鲜切片的菌落的总数，在夜间切断面和2厘米表面下方晚上冷藏后切割。些变化的差异。数的鲜切面条菌落，削减冷冻过夜并冷却切口过夜以2cm切口的表面的下方为13.33到16.67 CFU·克-1，割伤新鲜的黑色美女，第二天冷藏切块，第二天冷藏切块。品的菌落总数为16.70厘米×23.33 UFC·G-1，和黑色富士的样品的菌落，杯过夜的总成本和2cm至表面切割面积为122.67×143.33 CFU·g-1。在相同品种的鲜切面条西瓜的菌落到冷却过夜部分和2厘米切断面下方的总数量没有显著差异凉爽夜后表面（ P> 0.05）。的16S rRNA全形态不同细菌菌落PCR扩增的结果进行分析的琼脂培养基上的各种类型西瓜片上计数板（BCP）。使用无菌牙签，从菌落总数中随机选择50种不同的形态细菌菌落。化和培养后提取细菌DNA。用细菌16S rRNA的完整27f / 1492r引物进行PCR扩增，结果显示在图4中。2.可从图2可以看出，全长的16S rRNA不同的形态的细菌菌落的PCR扩增片段为1 000至2 000 bp和该片段的大小不显著不同，大约1500 bp。16S不同的形态的细菌菌落的细菌菌落的16S rRNA的综合的片段通过琼脂糖凝胶电泳在1％分离并通过凝胶共积分的50个频带的回收的rRNA序列同源性分析获得16S rRNA，编号B1至B50。条带进行克隆和测序，获得的序列大小在1471和1513bp之间。序列的结果与GenBank数据库中的BLAST比对。果表明，所有在数据库中的序列和的16S rRNA序列之间的相似性为98％至99％，和50组的序列的相似度和在数据库中的参考序列具有构建系统发育树（图3）。属于五组的细菌：金黄色葡萄球菌，芽孢杆菌属肠杆菌科肠杆菌科细菌，肠杆菌属，大肠杆菌和欧文氏菌。

　　些中，25的15序列肠杆菌类似于肠杆菌霍氏，10是类似于阴沟肠杆菌，埃希氏6序列8和大肠杆菌。
　　肠杆菌hermannii类似地，两个是类似于埃希氏菌属，欧文氏菌属的两个序列是相似的欧文氏菌属，葡萄球菌属7个序列10和松鼠葡萄球菌sciur葡萄类似地，三个是类似于葡萄球菌属，五大序列的芽孢杆菌三种类似于巨大芽孢杆菌和两个类似于aryabhattai芽孢杆菌。论和结论的西瓜是夏季水果罐头的热量是在夏季，大多数消费者在购买夏季流行。2014年，两个新闻说，“我不能继续吃西瓜一夜”已经引起了消费者对西瓜消费安全隔夜的极大关注。这项研究中，国家标准GB 4789.2-2016“确定菌落食品微生物检验的总数”是用来估计在福州市的3个不同品种的西瓜鲜切面条菌落总数，日常冷冻切割和过夜切割表面下方2厘米的样品。果表明，三种不同品种的西瓜的菌落总数为13.33至143.33 UFC·G-1，和菌落数低于国家标准GB 4789.2-甚至更低2016题为“在食品微生物学测试住区的总数的测定，”集落数是30〜300要求CFU·克-1。差分析方法的结果也显示，有同一品种的鲜切面条西瓜的菌落总数之间无显著差异，冰冻切片，直至第二天，在夜间冷藏后切割表面下方2厘米处。
　　表明，在低温下的冷冻可以显著延缓或抑制西瓜的生长，西瓜的切断面。
　　瓜在夜间过多的菌落不会引起食品安全问题。过测序在菌落的总数不同的形态的细菌菌落的16S rRNA的基因完整，我们发现，上述不同的形态的细菌菌落，主要是葡萄球菌属，芽孢杆菌属，肠杆菌属和埃希氏菌属。埃希氏菌属和欧文氏欧文氏菌的属，包括葡萄球菌属，巨大芽孢杆菌，芽孢杆菌aryabhattai，肠杆菌霍氏，阴沟肠杆菌，埃希氏hermannii黑森为巨大芽孢杆菌，芽孢杆菌aryabhattai [8]和肠杆菌霍氏[9]，阴沟肠杆菌[10]阴沟肠杆菌[10]大肠杆菌hermannii [11]和欧文氏菌属。[5]是土壤中常见的细菌类型[12]，上述肠杆菌科细菌均为致病菌株。估计西瓜的来源和养殖含有相关细菌的土壤。萄球菌sciur是葡萄球菌的致病株，主要来自空气和水[13]导出。上所述，在福州三个不同品种西瓜，夜间的切断面和2厘米保存后的切断面下方的样品的菌落切开的新鲜切片的总数的分析结果一夜之间冷却表明，冷冻西瓜一晚上没有出现在公告中。菌相乘和它们的数量来确定milliards.En另外，用于分析的16S rRNA的基因序列的方法的基础上，它也被指定由西瓜的表面感染的细菌为主要空气和土壤，具有低致病性。变类型。此，新鲜切割的西瓜在一夜冷却后不会由于细菌繁殖而造成食品安全问题。
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