为了确定在冷藏过程乌贼片的主导腐败菌，将它们包装并储存在低温（4±0.5）℃12天之后，将培养基选择性用于分离和筛选细菌免于恶化。过生理生化，形态学和16S rDNA序列分析，确定了低温贮藏过程中鱿鱼片的显性变化细菌。果表明，保存了12天的那种污染占主导地位的鲤鱼鱼片的是假单胞菌（56.25％），肉杆菌（12.5％）和二氧化铪。12.5％），Vagococcus（6.25％），Kurthia（6.25％），Providencia（6.25％）等。文鱼片;冷藏;改变微生物;隔离;鉴于营养学家努力减少饱和脂肪的摄入量;多不饱和脂肪酸的消耗量大大增加;然而，多不饱和会加速氧化过程。致肉的味道，颜色，质地和营养价值变差[1]。水鱼的特征是松散织物结构，高的蛋白质和脂肪饱和élevée.Après变换，运输和储存的过程中与微生物污染，肉的质量容易被氧化，从而导致鱼的变质和变质，以及其保质期。逐步失去营养价值和市场价值[2-3]。生物是鱼类变质和变质的主要原因。
　　年来，对造成鱼类恶化的微生物进行了进一步的研究。高白鱿鱼片冷冻和冷藏开始时导致变质的细菌主要是假单胞菌。秀李和他的同事调查了优势腐败菌在鱿鱼存储过程：占主导地位的微生物引起的鱼是荧光假单胞菌，这是负责鳃腐败盛行的微生物不同的改变[5]。

　　鱼中含有丰富的蛋白质和脂肪，淡水鱼在世界上优秀的品种，最稀有的一个和冷水最古老的生物世界，被称为“活化石鱼“而且他的肉很厚。骼柔软，含有人体必需的多种氨基酸。具有很高的经济和药用价值。前，有上负责腐败菌和保护的鱿鱼加工产品的技术菌的研究很少，阻碍了市场交易的新鲜和加工鱿鱼。这篇文章中，腐败微生物鱿鱼切片过程中在冷贮存过程分离和鉴定，为了提高在鱿鱼制冷过程腐败微生物的理解，并为研究和制备鱿鱼保护剂提供基础。料与方法材料鱿鱼用于贵州省渔业研究所惠水养殖基地研究所。要仪器和试剂离心机，德国Eppendorf;电泳仪，北京六一仪器厂，Gel-Doc2000凝胶成像分析仪，BIO-RAD，美国; PCR仪器，BIO-RAD，USA。

　　菌基因组DNA提取试剂盒（DP302），天根生化科技（北京）有限公司中间，中间pseudomonocyte，贝尔德 - 帕克防老剂，甘露糖醇琼脂培养基到哑，右旋糖琼脂胆盐绯红，中旬至Chache琼脂，敏感试纸多粘菌素在杭州滨河微生物试剂公司购买片剂药物有限公司准备和鱿鱼片保护三条鲜鱿鱼被收集在鱿鱼表面上省Guizhou.Le粘液渔业研究所的水产养殖基地的惠水县第一清洁并沿着腹部切开，消除内脏和鱼头。后用水清洗，去掉鱼骨并将其从皮肤上取下。

　　得鱿鱼的肉用无菌水漂洗几分钟，洗涤和脱水，冷库安装然后将鱿鱼片置于保鲜盒并在4±0.5℃下冷藏保存12天。
　　集被损坏的鱿鱼片用于分离和鉴定腐败微生物。离和耕种菌株的纯化在无菌条件下将10克损坏的乌贼片放置在50ml的无菌离心管中，并使用均化器手进行匀浆鱿鱼的件，然后向试管中加入20ml无菌水。放在振荡器上5分钟。1 mL上清液，每次稀释用3次重复梯度稀释至10-8。200μL稀释溶液分别置于不同的选择性分离介质中并电镀。1显示了不同培养基的培养温度和分离时间。

　　
　　培养基上生长菌落后，从培养板中取出典型的生长菌落。LB琼脂培养基用作纯化培养基，将混合物分离并纯化三次以获得单菌落用于初步鉴定菌株。理和生化试验菌株参考“鉴定手册常见的细菌系统” [6]，以分离分离和纯化的细菌的生理生化鉴定。析使用用于提取分离的单细胞细菌基因组DNA的单细胞DNA提取试剂盒的16S rRNA基因的，并且该过程是指试剂盒的说明书。rRNA基因测序和系统发育分析：直接扩增引物的16S rRNA基因：5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3“（位于第八到大肠杆菌的16S rRNA基因的第27基本位置）; 5'-ACGGCTACCTTGTTACGACT-3“（位于位置1512到大肠杆菌的16S rRNA基因的1493）[7]。PCR扩增条件：预变性在95℃持续5分钟，接着通过变性在94℃下1分钟，退火在55℃下1分钟，延伸72℃1.5分钟，循环32次，最后在72℃温育10分钟。过1％琼脂糖凝胶电泳（体积比）测定扩增产物，并直接进行Bioengineering（Shanghai）Co.，Ltd。测序。果和讨论的优势菌的分离和纯化可以通过在选择部件用于纯化目的的中间选择优势菌株来实现，并且通过消除重复获得16个单细菌。这16种菌株进行以下实验。的单独的细菌菌株的生理生化鉴定生理生化试验的结果示于表2结果表明，没有一个16株的可以使用葡萄糖，以产生气体，不能产生硫化氢，不能用担心。因的分析ADNrS扩增分析，测序和Blastn比对准从16S rDNA基因的分离表明，16株的16S rDNA序列的相似性是相似的，该模型菌株在99.75％和100％之间。个细菌的16株的系统发育分析的结果示于图1中的16个分离物主要分布在γ-变形（γ-变形菌和芽孢杆菌），分别占75％和假单胞菌属的25％（ 56.25％），食肉杆菌。型（肉杆菌，12.5％），哈夫尼菌属（12.5％），Vagococcus（6.25％），库特（库特氏，6.25％），普罗维登斯（普罗维登斯），6.25％）和其他6个属。16株的的16S rDNA的系统树示于图1中讨论的不同类型，来源和鱼存储方法中，占主导地位的降解菌的组合物是复杂和变化的。冬季和春季期间，负责恶化优势菌的种类基本上冷冻鱿鱼，主要是革兰阴性菌，主要是嗜冷菌的存储一样，丁香假单胞菌，荧光假单胞菌和杀死热。状和被破坏的细菌Shewanella [8]。-2℃微冻结和鱿鱼在4℃冷藏的情况下，H2S和假单胞菌生长迅速。成恶化的主要细菌是希瓦氏菌和假单胞菌属。冷藏包装鱿鱼，希瓦氏菌，荧光假单胞菌和杆菌是主要优势嗜冷菌。9]加入山梨酸0.2％苯甲酸的改变水产品的pH值可以抑制酵母菌，霉菌和许多真菌但可以确保乳酸菌成为优势菌[10]。真空包装下，主要的鲤鱼改变细菌是气单胞菌和肠杆菌[11]。旦提取萝卜种子蛋白被转化为鱿鱼切片，包装托盘的存储可以有效地减少微生物变更[12]的生长。经汤和同事分离和酒吧的冷藏期间确定的腐败菌，并有四个优势腐败菌，包括假冬虫夏草有很强的能力rotogénique。13]爱芳刘和他的同事调查了潜在rotogénique金枪鱼假单胞菌，冷库安装鲍曼不动纹枯病，结果表明，假单胞菌不得不衰减较高的阻力。14]最初从鸡肠中分离出酿酒酵母。有研究表明，性别，直接关系到肉的恶化，却是改变豆腐[15-16]的具体变化。酸菌广泛存在于自然界中，其物种多样性丰富。们的许多属被确定为引起食物变质的恶化的细菌。
　　肉目（Carnivora）是水产品中常见的乳酸菌[17]。变形大气或气调包装中，小型黄鱼风化的主要生物是马齿苋（Carnobacterium maltaromaticum）[18]。房中的Hafenia容易导致真空包装中肉制品的变质[19]。这项研究中，单菌的16株被分离并通过主要分布于假单胞菌属，性别库特，食肉目，Hafni和Pro改变鱿鱼冷冻保存了12天的微生物鉴定。Widdens和Rosococcus的种类。中，假单胞菌属占优势种。本文中分离出的属性的旋转能力仍有待探索。
　　本文转载自
　　冷库安装 https://www.iceage-china.com