目的:探讨实时荧光定量PCR(PCR)技术在冷冻沙门氏菌快速分型检测中的应用价值。法:从2018年3月至2018年7月收集2000份冷冻禽肉样本。用传统的标准方法和荧光荧光实时PCR快速检测技术对结果进行检测和检测。果:荧光实时PCR显示,该组(3.80%阳性率),比传统的标准方法(38%)更高显著中检测到沙门氏菌76个样品(1.90 %)。异有统计学意义(p <0.05);沙门氏菌血清型的鉴定表明,海德堡,肯塔基,伤寒和肠炎血清型占优势。
论:实时荧光PCR检测技术对冷冻沙门氏菌牛肉的快速分型检测有积极作用,冷库安装有助于提高沙门氏菌的检出率,可快速分型,补偿时间长。统的标准测试期及其操作繁琐。陷具有较高的临床应用价值。门氏菌是一种天然存在的食源性病原体。着现代临床试验技术的不断发展,临床上发现了1000多种沙门氏菌,严重影响人体健康。动物。响。统的鉴定沙门氏菌的方法是基于形态特征,生理和生化标志,培养特征,抗原特征,噬菌体特征等。
试相对复杂和耗时是不够的,这不会促进扩展和应用。时定量PCR(RTFQ PCR)是Applied Biosystems于1996年在美国引入的一种新的定量测定技术。过荧光探针染料或荧光标记物的特异性实现PCR产物的检测。
相应软件相关的反应过程的监测使得可以分析产物并计算待测模板的初始浓度。有研究已将该技术引入冷冻肉类和沙门氏菌肉类的快速分型测试中,根据该文章,它从2018年3月至2018年7月提取了2,000份冷冻禽肉样本。用实时荧光PCR测定技术的评估如下所示。
息和方法一般信息。2018年3月至2018年7月收集了2000份冷冻禽肉样本样本,包括897份冷冻家禽和1,033份冷冻动物。法(1)试剂。化试剂由北京路桥有限公司提供泰国SA提供的分类用于鉴定血清,分离培养基,预富集和后富集。(2)仪器。采用南京北登电子商务有限公司提供的自动核酸提取工作站和实时荧光PCR仪,自动微生物鉴定和药敏分析仪。(3)检测方法。测内容均符合国家标准沙门氏菌富集培养试验方法,自动核酸提取站用于核酸提取(珍珠法)磁)。一定的反应期后,通过磁场将液体与磁性颗粒分离,并回收并洗涤颗粒(磁珠-DNA的混合物)。成每个程序后,使用PCR检测试剂盒进行实时荧光PCR PCR反应检测,以检测沙门氏菌的敏感性和特异性。旦测试完成,PCR测试为阳性并接种和培养增殖溶液。过选择无色半透明H25菌株和可疑菌落检测生化反应,然后在适当的温度环境下将其置于营养琼脂上(37)。°C)逐渐扩大作物,最后使用自动微生物反应和敏感性进行鉴定和分析所有操作均按说明完成。血清学分型鉴定中,将生化试验阳性菌株种植在潮湿环境中诱导的低琼脂琼脂平板上,然后进行单因子血清多价血清。果通过实时荧光PCR检测,本组共检出沙门氏菌76份(阳性率为3.80%),远高于传统标准方法的38(1.90%)。异有统计学意义(P <0.05)。
门氏菌血清型鉴定主要基于海德堡血清型,肯塔基血清型,伤寒血清型和肠炎血清型。论近年来,中国处于经济快速发展阶段,随着人口生活水平的提高,对家禽和牲畜等肉制品的需求不断增加。
此同时,冷冻肉类和冷冻肉类产品的数量有所增加,而且这个数字有所增加,对许多冷冻冷冻禽肉批次的检验提出了更严格的要求。果检查期延长,不仅会影响整个冷冻肉供应链的速度,冷库安装还会限制冷藏室的营运效率,营业额,等,并增加冷室的旋转压力。伤寒沙门氏菌是由各种类型的沙门氏菌引起的各种形式的人,家养和野生物种的通称。
染沙门氏菌或携带粪便的人可能会污染食物并导致食物中毒。统计,世界上不同类型的细菌的细菌中毒之中,根本原因往往是由沙门氏菌引起的,中国第一,已多元化测试特性的内陆地区,广泛而复杂。统的沙门氏菌检测主要包括分离和培养,预富集和后富集检测,生化鉴定和分型测试。
丹桂的研究表明,传统的检测时间大约需要4到10天,这显示了其耗时的性能。力,很难满足实际工作需求。时荧光PCR检测技术主要使用DNA扩增反应来测量每个聚合酶链反应(PCR)循环后荧光化学品的产物总量。过荧光信号实时检测PCR过程。于在PCR扩增的指数期期间模板的Ct值与模板的初始拷贝数之间存在线性关系,因此可以是定量基础。这项研究中,实时荧光PCR显示在该组中检测到76个沙门氏菌样品(阳性水平:3.80%),这显着高于传统标准方法38(1.90%)。异具有统计学意义(p <0.05)。以看出,实时荧光PCR检测技术具有高检测率。海德堡,肯塔基州,伤寒和肠炎血清型中可以观察到更详细的分类,这与赵建梅等人的结果一致。之,PCR检测技术实时荧光对快速打字测试冷冻牛肉产生积极的影响,沙门氏菌,提高了沙门氏菌的检出率,可以快速输入和补偿长期的传统标准测试。
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