摘要为了研究油棕榈树叶的解剖结构，并获得高品质的冰冻切片，我们所研究的油棕榈叶的冰冻切片的关键参数和优化的切割方法通过冰冻切片快速观察油棕榈叶的解剖结构。果表明，将油棕榈叶用作实验材料，并将其预先切成2mm×2mm的片;冷冻内置块为5 mm×5 mm。冷冻至-30℃冷冻平台，冷冻被设定在-20℃下在头部-10℃，厚度为5微米或更大的冰冻切片可被切割及效果部分令人满意。方法可用于研究切片制备和油棕榈叶解剖结构的显微观察。油棕榈遗传资源的鉴定和评估具有重要意义。期的冰冻切片数量CLC S565.9代码：10.12008 /手掌j.issn.1009-2196.2018.11.016Coupe冻结FrondZHANG大鹏丰没漓秦王勇曹海棠HongxingAbstract为了世界杯流苏吊带的高品质油棕研究吊索的解剖结构。析了与油棕叶片冰冻切片相关的关键因素，并对油棕叶片的冰冻切片进行了优化，冷库安装以快速观察结构。来自棕榈油的棕榈油作为实验材料切成2mm×2mm的切片，并以5mm×5mm加入以冷冻。快速冷冻表至-30℃，冷冻室被设置在温度 - 将样品温度为-10℃冷冻油棕吊索切片在切片式厚度为5μm或更大，具有更好的切片效果。离冷冻可用于对油棕榈藻体的解剖结构的显微镜观察准备的部分的这种方法，它在鉴定和评估重要的应用价值棕榈油遗传资源。棕的关键词;弹弓;油棕的冰冻切片（油棕黄灯笼。
最高石油产量在木本油料植物的世界一个具有开发和利用前景广阔。1]然而，中国油棕产业起步较晚，主要来自国外，缺乏自主知识产权品种[2]。
种的引入需要长期引入和测试观察，以确定它们是否可以应用于生产。此，有必要确定和评估油棕榈遗传物质的资源并充分利用它们。子的解剖切片的遗传物质资源[3-6]识别的重要基地之一，并迅速获得了方法，有利于提高资源评估的效率油棕遗传物质，对油棕遗传物质的鉴定和评价具有重要的应用价值。蜡作为植物的，因为缺陷的部分，主要的技术如预处理和麻烦的操作的持续时间长的部分[7]不允许遗传棕榈硬件资源的快速鉴定大量采用冷冻切片技术只能弥补这些不足[8]。而，目前大多数关于该技术的研究都被用于动物组织的医学诊断[9-12]。然植物组织[13-15]的一些冷冻切片已经报道，由于在不同平台上冷冻段中使用的冷冻机和采样头内的不同类型的植物组织结构中的不同特性也有所不同。完全适用于棕榈油组织切片的研究。此，要选择适合于冰冻切片方法和油棕叶的织物的流量，冷库安装温度的方法，以及调整冷冻机在温度和所述探针头是特别重要低温恒温器。
这项研究中，油棕榈树树叶为实验材料，并通过切割技术冷冻用于研究的快速采集冷冻机油棕榈叶切片的合适的方法，并且参数油棕叶片组织冷冻切片的温度和温度参数。于油棕叶片解剖结构的分析，对棕榈油遗传物质资源的鉴定和评价具有重要的应用价值。料与方法从中国农科院热带农业，油棕品种，2油棕苗的科学椰子研究所获得的材料，以及美国樱桃公司OCT使用的涂层剂，低温剂和Leica显微镜。
CM 1900，Leica DM 2500;用纯甘油进行分析组装。冻的方法和探针头温度参数被优化：低温恒温器是由用于调节温度，即冷冻三个要素（0〜-35℃），快速冷冻表（0 - 45°C）和样品头（0~-50°C）。于初步分析，优化方案冰柜，快速冷冻表和样品头如下：快速冷冻站的温度上定量或定义 - 30°C，快速固定压力测试设备;冷冻机和样品头设置为变量，即-5，-10 -20°C，用于过滤最佳温度。
部分的厚度相比为5mm×5mm的预制带×5 mm.La刀片进行测试切成尺寸为2mm×2mm且所述第一切割刀片被放置在一个嵌入框其中加入了OCT包合剂。其放在低温恒温器的冷冻台上以完成整合。决于优化的结果，该参数的低温恒温器中定义和嵌入块的尺寸是第一固定在探针头和表面待切割修剪成一个尺寸为3毫米×3 mm以刀片材料为中心。用厚度为5，20，40和60μm的切片来比较薄膜的效果。
用切割刀片取出切片被设计之后加入甘油，添加甘油在加入薄片时密封，并且比较直接添加的效果的各种处理，添加或不添加甘油3良好的甘油处理。温恒温器和切割后的效果的结果和分析优化低温恒温器温度设置和头在表1中给出在不同的温度下，将冷冻的涂布剂的硬度随增加在较高温度（-5℃）和较低温度（-20℃）下难以控制冷冻部分的厚度。这些中，当冷冻室和样品头都具有一个温度-5℃时，涂覆块是软的，而在-20℃下，该涂层是硬嵌段，这不允许控制油棕榈叶的冷冻切片的厚度。的5微米切片可以用-10℃头部和在-20℃下冷冻在高等植物中，泡孔直径通常为10至100微米的切割。16]研究发现，海绵棕榈油布的表皮，围栏和细胞的近似直径分别约为10，25和15μm。以看出的是，晶片5微米的厚度允许获得的单层细胞结构，其适用于油棕榈叶的解剖结构的观察和分析。
们在图1中的石蜡切片加工看到和染色更清晰叶肉细胞，该领域是分层的，并且获得片时间长，冰冻切片的速度快，使视野清晰，没有重叠，观察效果良好，可按要求进行。色并制作永久性切片。同厚度的切片的比较在图2中片清晰度的程度与在上述片的厚度的增加逐渐减小被示出，晶片5微米（A）的所述解剖结构是清楚可见的，该切片20μm厚（B）具有模糊的视觉，使得难以分析叶的解剖结构。构：40个厚度的部分（C，D）用于观察。加甘油的不同处理结果示于图2中。
3，立即加入丙三醇加一个保护玻璃（A），用于冷冻切片与清晰的视野和一个完整的片材结构体，其是用于棕榈叶的解剖结构的研究和分析有用油;甘油的添加（B）不促进盖玻片的恢复，这有利于气泡的产生，并影响观察，分析和获取表的解剖图像：在不添加甘油（C），切片将失去水分，叶片的解剖结构将被破坏。微观察变形不利于观察和分析叶片组织中的栅栏组织和毛圈布。论和结论冷冻切片技术主要用于人体或动物器官的医学研究[17-18]，不适用于植物组织[19]。管在该研究中获得的参数产生更好的油棕叶片，但它们仍处于初级研究阶段。石蜡切片技术相比，可以在染色，干燥和永久切割中进行进一步的研究。于组织的物理性质不同，应分别获得根，茎，叶，花，胚和其他油棕组织的冷冻切片。研究的结果可用作研究植物其他叶片的冷冻切片的初始参考，然后进行优化以获得最佳步骤和参数。研究表明：作为试验材料的棕榈油的鲜叶，固定在所述平台冷冻-30℃并在-20℃冷冻机中冷冻至-10℃以样品的头部可以切割厚度大于5微米的冷冻切片。
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