目的:探讨冰冻切片生产过程中常见问题及对策,提高冰冻切片质量。法:根据组织的特点,对每个环节进行标准化,并采用相应的处理方法。果:光学显微镜观察切片组织完整,切片组织完整,厚度均匀,效果良好,切片明亮清晰。
论:高品质冰冻切片的关键因素是温度和材料寿命,冷冻温度,切片技术,固定方法和染色。理技术;冰冻切片;常见问题;响应测量[CLC编号] R249 [文件编号] A [商品编号] 1005-0019(2018)11-294-01冷冻部分对应于低温和恒定冷却条件。新鲜组织快速冷却到一定硬度,然后切片[1]的方法,由于其快速和易于使用,已经常规应用于快速病理在手术期间,外科医生可以制定外科手术计划。常规石蜡切片的诊断相比,限制和困难更受限制:由于时间有限,组织未经预处理,例如固定和脱水。胞形态不同于常规石蜡切片,并且通常可能发生冰晶和细胞膨胀。明确的组织结构现象直接影响快速病理诊断的速度和准确性,误诊和漏诊,迫使技术人员生产符合诊断要求的高质量切片。过多年的实践经验,作者总结了生产冷冻切片过程中遇到的常见问题,以及根据基于样品特征提高冷冻切片生产质量的步骤。院妇科肿瘤和乳腺疾病。理学家继续生产冷冻切片,通常选择1至2片代表性病变组织,并在必要时增加切片数量。果首先去除粘液,钙化和骨组织,组织的大小应该是合适的,通常为1.5厘米×1.5厘米×0.3厘米。卵巢肿瘤通常表现出大量坏死和尽可能少的坏死区域;应尽可能去除乳房组织以去除脂肪组织。速冷冻将织物放在冰块托盘上,使用涂层剂快速冷冻。物应尽可能平整。片机的基础温度通常设定在20°C,具体取决于我们部门常见的冷冻标本的类型,并根据不同的组织进行调整(见表1)。片将冷冻织物块连接到切片机支架上,并启动粗调推进和移除按钮以使织物平整。整预切割的厚度,取决于不同的组织,原则上薄的密集细胞切割,薄和稍厚的多细胞纤维切片,通常5到10微米(见表1),我们的家庭通常切片厚度为5微米。刷子将切片穿过并将其粘贴到载玻片上。定切片后,将载玻片及时置于固定液中,以避免细胞核变性,染色能力下降,结构模糊[2]。定剂的选择必须基于冰冻切片的特点:第一,组织细胞的原始结构,不能被破坏,色彩生动,结构清晰,其次,穿透力很强,易于。许多类型的固定液,其性能不同,应强调其选择和固定的速度。外,组织附着还与组织成分和醛浓度,pH,渗透,温度和组织浸入率有关。苏木精酊染色溶液1分钟,用水轻轻洗涤;用0.5%乙醇盐酸洗涤几秒钟,轻轻洗净; 1%氨水,水再次蓝色几秒钟,然后洗净; 0.7%曙红染料溶液10秒,轻轻洗涤; 80%乙醇,95%乙醇乙醇无水I,乙醇绝对II,二甲苯I,II每30秒,在二甲苯周围擦拭样品并用中性胶密封。估切片质量的标准根据显微镜下细胞收缩的程度和切片的染色质量来判断[3](见表2)。冻切片的常见问题和纠正措施冰晶出现在冷冻和凝固过程中,形成冰晶,导致未结合的水在细胞质和间隙空间中逐渐沉淀。策:材料的尺寸和厚度应适当,因为如果厚度太大,冻结速度会受到影响。材料被吸收时,避免将其与水混合。结时间必须很短。冰或液氮以减少冰晶的形成。[4]脱毛有时在坏死或高含水量组织中观察到,例如子宫肌瘤粘液变性。策:首先,在切片前用纸巾去除多余的水分。片不应该太厚。下一片固定,然后用吹风机干燥并着色。织块被分离,主要是由于组织和冷冻头的冻结,并且在外力的作用下稍微脱离。外,在冷冻头上使用的残留涂层剂和切割组织块的过度进展可能导致组织块从冷冻头落下。
策:使用过的冷冻头应及时清理。织组织时,应该是进步和进步的。[5]未完成或未治疗主要原因是脂肪和坏死组织过多,冷冻时间过长和冷冻头温度不足。:冷冻温度应根据组织块的类型进行调整,组织块含有过多的脂肪或坏死组织。冻温度低于正常组织。活组织达到所需温度时,其温度也较温和,影响切片的完整性并延迟冻结报告的发布[6]。于乳腺癌中的前哨淋巴结,必须在冷冻前除去周围的脂肪组织。
果织物已用福尔马林固定,则必须将其冷冻并切片。规取样后,使用滤纸吸收周围的水,并将其整合并整合。进入液氮后取出药剂,放置在低温恒温器的冷冻台上片刻,将组织切割,切片,干燥并固定,无需直接固定[8]。织必须适应织物的尺寸过大,片的强度过大,很容易产生皱纹,刀痕,导致织物的解体,增加分离的难度,影响诊断病理性的。反,如果织物太小而且破损,则将其嵌入同一水平面是不合适的,这会影响切片操作,导致忘记诊断或误诊[9]。织的标识必须清晰,必须明确标识关键要素的组织,并明确界定组织的方向。疑肿瘤,冷库安装淋巴结和带有信封的组织的范围需要暴露整个部分并包含整个包膜。
层剂的用量应适当,切片刀损坏太大,涂层效果太少。果冷冻时间太长,不应立即切片。于胶合的载玻片不应存放在冰箱中或室温下。卷板和切片刀以及支撑板必须保持清洁。要的是讨论快速冷冻诊断以确定病变的性质(例如,评估良性和恶性组织),了解恶性肿瘤的扩散,并确定肿瘤的手术切缘。而言之,它是快速和准确的:一旦确定了组织的厚度和尺寸,技术人员必须进一步探索适合服务低温恒温器的冷冻时间和温度,并尽可能地减少生产时间。证冷冻部分的质量。10。作良好冷冻切片需要三个条件:1)优质低温恒温器,2)完美掌握冷冻切片技术的技术人员,3)在病理性临床诊断和一些培训方面具有丰富经验的病理学家。(助理或高级医疗主任的级别),应该对冻结部分引起的人类错觉有所了解[11]。之,选择合适的温度和时间是确保冷冻部分质量的关键因素之一:最好的冷冻生产计划应该基于第一个周期的设备和条件。质量的冷冻切片不仅要掌握重要的技术操作,还要承担高责任,不断总结经验和教训,逐步提高冷冻切片的质量,缩小与常规石蜡切片和减少人工幻象。理诊断提供强有力的支持和保护。
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