为了检查对前人类精子的运动学参数十二碳六烯酸（DHA）的各种摩尔浓度的和在冷冻保护甘油柠檬酸蛋黄（GEYC）冷冻后的影响，并探索PUFA的n-3。冻人精子的应用价值。法33案件精液样本，从专业从事计划生育广东省医院人类精子库的供体2016年3月和2017年四月之间选择了在冷冻保护剂GEYC，外源性DHA的基础与GEYC精子混合。最终浓度在溶液中分别为0毫摩尔/ L，对照组，0.317毫摩尔/ L的DHA组1中，从0.634毫摩尔/ L的DHA组2和1.268毫摩尔/ L的DHA组3英寸精液分析计算机辅助系统SKA 5.2使用添加防冻剂和0至8小时后冷冻保存之后检测精子运动学参数。果添加预冷冻精子的各组的保护剂中，只有VCL和VAP值DHA组3均大于对照组（P <0.05）显著以下后。他组间运动学参数无显着差异（P> 0.05）。0，4，5，6和8小时后的冷冻保存，仅DHA组3具有偶尔运动学参数冷冻后0和8小时之间降低和差异有统计学显著（P <0.05）。组间运动参数参数无显着差异（P> 0.05）。论DHA的鸡蛋，柠檬黄色甘油冷冻保护剂前后适当congélation.L'additionDHA后没有改善人类精子的活动力参数除了可能会影响其他congelés.L'addition精子DHA可能会影响冷冻前后的某些运动参数。生负面影响。不饱和脂肪酸N-3;精子的运动学参数;精子凝胶;十二碳六烯酸[分类号] R691.9 [文献代码] A [项目编号] 1674-4721（2018）4（a）中-0004-05Influence添加在培养基中的各种摩尔浓度的DHA的cryopréservateurs之前和cryochirurgieMA骏杰庄佳明1邓顺梅唐云卫GE2 bing1，2王齐欣张玲zong1部后人类精子的运动参数甘油蛋黄柠檬酸广东省计划生育科学研究院（广州市计划生育医院），广东广州510600;重点实验室繁殖和遗传男性，卫生和计划生育委员会，广州510600科技计划生育广东研究所，中国【摘要】目的探讨影响加入在cryopréservateurs媒体甘油和柠檬酸鸡蛋蛋黄（GEYC）二十二碳六烯酸（DHA）的各种摩尔浓度的。动学参数ETERS前和后冷冻人精子探索的多不饱和脂肪酸中的n-3冷冻人精子的方法中的应用价值从供体共33例精液样本的广州市计划生育专科医院一个人类精子库自2016年三月到四月2017筛选过程中精子sélectionnés.SelonGEYC冷冻保存液中，外源性DHA的白酒种子混合物中的浓度为GEYC 0毫摩尔/ L，对照组，0.317毫摩尔/ L的DHA组1，0.634毫摩尔/ L的DHA组2和1.268毫摩尔/ L的DHA组3分析系统计算机辅助精子在SCA 5.2使用了单独加入冻存和复苏gelée.Résultats冷冻保存和果冻复苏之后检测精子运动学参数0-8小时s的速度曲线（VCL）和路径（VAP）的平均速度DHA组3均大于对照组（P <0.05）其它组之间显著稳定检索运动学参数显著下（P> 0.05）。0，4，5，6，8小时回收冷冻后，唯一的运动参数DHA组3偶尔下跌，相反统计学显著差异3冷冻治疗后0-8小时，大部分的运动参数各组间差异无统计学意义（P> 0.05）。论DHA在低温环境中添加GEYC不前和冷冻后增加精子的运动参数。
当添加DHA可能会通过其他方式影响冷冻精液。入了大量的DHA可能之前和之后冷冻对运动学参数的部分负面影响。[关键词] n-3多不饱和脂肪酸;精子冷冻手术;精子的运动学参数;精子十二碳六烯酸冷冻保存在精子银行的一项重要任务和辅助生殖技术实验室。胶加温过程会破坏人体精子结构的完整性，从而影响精子功能。多动物实验表明，PUFA的n-3（N-3 PUFA）是通过加入22直接加入到食品补充剂[1-6]和冷冻稀释剂[7]，特别是碳原子。二碳六烯酸（DHA），一种类型的与n-3多不饱和脂肪酸，增加新鲜和冷冻的精子在哺乳动物中的质量。Vireque等人[8]表明，富含大豆卵磷脂加入PUFA的n-6和n-3的冷冻保护剂含有蛋黄人类精子可以有效地防止冻害人类精子。知的是，通过检测CASA运动学参数的结果被显著与体内受精率和在体外和设计所需要的时间相关。9] DHA是最重要的n-3 PUFA [10]与精子功能相关联，并且起着在男性生殖过程[11-12]和在精子发生和受精动物非常重要的作用[13]。前，很少有人报道单独DHA对人精子冷冻保护剂精子运动参数的影响。文采用通过控制实验手册和处理世界卫生组织（WHO），第5版的人类精子推荐甘油抗冻剂柠檬酸蛋黄（GEYC）。
9]该试剂是基于防冻剂人精子，加入DHA的不同摩尔浓度，在加入具有不同摩尔浓度的冷冻保护剂和复苏后0-8小时，探索PUFA的后检测精子的运动学参数的变化n-3型DHA在人类精子冷冻保存中的应用价值。人类精子库我们的机构从2016年3月获选2017年4月资料与方法一般资料33例，筛查供体，冷库安装年龄22〜36，身体健康，无遗传性疾病家族史，没有体检还没有找到。丸，附睾和输精管都是异常的。2至7天禁欲，洗手用消毒肥皂，消毒湿揩巾，用于清洁阴茎和尿道外，自慰方法采取薄精子注射在干燥的烧杯中并在无菌宽开口，37°C水浴完全液化。精样品基于所述防冻剂GEYC：在种子GEYC混合物中的浓度的外源DHA最终摩尔分别为0毫摩尔/ L，对照组，0.317毫摩尔/ L的DHA组1和0.634在在DHA组中的2毫摩尔/升和DHA组为1.268毫摩尔/ L，对照组是由精子 防冻剂GEYC，无添加DHA，DHA组1，2 DHA，DHA 3加入ADH基，化合物精子 防冻剂GEYC DHA，并添加DHA在精液混合物和冷冻保护剂的最终浓度分别为0.317毫摩尔/升DHA组1 0.634毫摩尔/升DHA组2和1.268毫摩尔/ L对于DHA组3的试剂和试剂cryoprotecteur GEYC根据实验室检查和治疗人类精子，第5版的，pH为7.0，结果的WHO实验室方法制备，并且所存储的文书文化b是一种无菌生长，没有精子的毒性;葡萄糖，柠檬酸三钠，甘氨酸和GEYC防冻剂需要甘油购自Sigma（Sigma公司，美国）购买。器Makler计数细胞（Sefi-Medical Instrument，Israel）;计算机辅助精液分析系统（CASA）是SCA 5.2（Microptic Inc，Spain）。法SCA 5.2系统分析精子运动学参数每个精子团加入到DHA，充分混合并温育5分钟的冷冻保护剂具有不同内容，然后用移液管10微升精子和冷冻保护剂的混合物的在混合物中。数细胞Makler，温度始终保持在37℃，经200个活动精子在SCA 5.2系统精子运动学参数检测，在所述路径的特定的平均速度（VAP），直线的速度（VSL ）曲线速度（VCL）的横向位移头（ALH的，振幅），击败交叉频率（BCF），平直度（STR），线性（线性LIN）。冻和精子变暖每组精液用具有DHA含量不同的冷冻保护混合，进行精子检测，然后浸渍1分钟，在1厘米的液氮上面的运动学参数液氮。冻保存一周后，精子样品收集在液氮，在室温下放置1分钟，并置于水浴中，在37℃，6分钟，然后，按照以下的方法如上所述，复苏后分别检测到0，1，2，3，4，5，6。7，8小时精子的运动学参数。用SPSS 22.0统计软件进行统计分析，测量数据被表示为平均值±标准偏差（X±S），并使用单向方差分析进行比较，差异p <0.05。习意义。
果不同精子和DHA组的运动学参数比较。液加入到具有不同水平的ADH，充分混合，并温育5分钟防冻剂EGCH，和选自与对照组1的差异是统计学显著（P <0.05）。DHA组和对照组之间VCL和PAV的差异具有统计学意义（p <0.05）。他组之间的运动学参数没有显着差异。（P> 0.05）（表1）。个组中的复苏后0和8小时之间运动学参数的比较：0 BCF h与DHA组3，VCL到下午8点和STR在上午8点均有统计学显著在冷冻保存4小时后（P <在DHA组3中的VAP基，WOB，BCF和5小时STR DHA 1之间的差异具有统计学显著（p <0.05）DHA组3冻存BCK和组VCL和DHA之间的差后4小时2至6小时是统计学显著（p <0.05），但冷冻保存后在其它组之间的运动参数没有显著差异（p> 0.05）。）讨论的多不饱和脂肪（多不饱和脂肪酸）包括串联的n-3的主要脂肪酸，n-6和N-9，但重要的生物学意义是PUFA的n-3和n-6。前，国内外许多研究人员集中研究多不饱和脂肪酸，尤其是N-3多不饱和脂肪酸，它可以提高浓度和精子活力，改善牲畜繁殖能力。有的研究[10]表明，DHA是最重要的n-3 PUFA相对于精子的功能，它可以促进动物精液的成熟;当DHA整合到精子膜中时，精子的质膜具有良好的流动性。DHA还参与精子膜中蛋白质介导的细胞反应，影响脂质介导的细胞生成，细胞信号传导和基因表达。
Martinez的-索托等人[14]表明，精子膜的PUFA是主要DHA，占总PUFA的50％，所述精浆中DHA含量负责总PUFA的25％，则精子标本，恢复率大于50％。精子细胞膜中，DHA含量显着高于精子样品的回收率<50％。Aurich等人的研究。[15]表明，由于季节性摄入量不同，马匹的冷冻复苏率不同。研究表明，在精液和精子DHA含量可作为一个指标来衡量冷冻后精子公差潜在精子和受精的潜力，以及N-3精子的膜内容尤其是DHA，正冷冻后相关精子运动学参数[14] Safarinejad的等人的研究[16]表明，补充的n-3 PUFA的患者患有oligosmie可以提高精液质量;因此有必要探索在精子中直接添加DHA以改善精子和精浆中的局部DHA含量。子冷冻保存前后运动学参数的影响也影响精子的受精潜力。这篇文章中，在与中国人类精子库的当前状态组合，DHA的不同比例已添加到GEYC型冷冻保护剂对人精子前研究人类精子的运动参数的影响，冻结后建议在精子供体的冷冻保存中探索PUFA n-3。用的视角。果表明，具有0.317毫摩尔/ L（DHA组1），0.634毫摩尔/ L（DHA组2）和1.268毫摩尔/ L（DHA组3）的最终摩尔浓度外源DHA加入到各组，独立地从冻结前的时期。冻后人精子的运动学参数没有改善。入精液后预冷冻每组保护剂中，VCL和VAP最高摩尔浓度组（DHA组3）的值比对照组低显著，无统计学差异显著其他组之间的运动学参数。0，4，5，6和8时，只有组3 DHA至偶尔减少运动学参数，相对于其他三组差异有统计学显著。动学参数之间的差异没有统计学意义。
究表明，DHA起到的完整性和冷冻精子的重要作用，但它也密切相关，精子的运动参数。物实验表明，在冷冻保护液中加入DHA可以改善精子的冷冻效果[7]。已经证明，外源性DHA GEYC型防冻剂人类精液中没有前和冷冻后显著提高精子的运动参数。项研究的结果是相似的精液DHA周的1500毫克的富含DHA的油，鲸参数和的脂肪酸组合物口服给药的[17] 10后的口服给药后参数的变化精子膜没有变化，但抗氧化剂。着水平的增加，DNA片段化的速度降低。DHA对人精子的效果不能改善正常精液参数表现，但通过减少遗传物质的抗氧化，例如DNA片段化的速率。究人员最近报告的动物，如实验：食物除了N-3多不饱和脂肪酸（来自微藻衍生）的显著减少了VPA，VCL，VSL，ALH，游泳距离和能量代谢的运动学参数牛精液。失[18]，但在细胞膜流动显著上升能起到精子冷冻作用：无论是单独加入的多不饱和脂肪酸多不饱和脂肪酸或与维生素的组合后的家畜参数连续食用60天E，精子的冷冻后的动力学/解冻产生负面效果[19]饮食摄入量的n-3 PUFA的和n-6具有的体积没有影响在牛和公羊精液新鲜精液，精子的前和冷冻后的浓度与精子的成直线运动的数量，和精子膜的流动性不是线性的。大变化[20-21]。知PUFA，尤其是DHA和DPA促进精子质膜的流动性。膜的精子和流动性的冷冻保存的成功率之间的关系是使用防冻剂进入精子和脱水精子质膜的是适度的流动性，但流动性过剩可以伤害精子的完整性。这项研究中，精子是正常精子供体，用外源的DHA和其它基团也为DHA组3，组的最高摩尔浓度，这可以归因于熔融的组精子膜。但不能提高人体精子冷冻前后的运动参数。
研究表明，[14]，在n-3 PUFA，与用于精液正常参数人类精子的膜尤其是DHA水平，比在患者少精子症显著高，低精子和少精子症。此，根据这一研究结果，我们可以进一步探讨外源性DHA是否是患者少精症，精子数量和精子oligozoospermie.Il冻结效应有利也有可能进一步探索正常人类精子的最佳冷冻保存。充DHA的浓度和DHT对人运动学参数，如DNA的人类精子的冷冻保护剂的裂解速率的影响。前关于DHA对精液影响的研究集中在两个途径：食物补充和直接添加到精子。多数动物实验表明[1-6]该膳食补充的n-3 PUFA可以改变精子的膜的脂肪酸组合物，特别DHA的含量，从而提高了新鲜和冷冻精液质量。了膳食DHA，一些研究者已经试图在羊[7]的冷冻保护液中添加PUFA直接海洋鱼油（主要是DHA和EPA），由于其强大的膜通透性，进入精子以保护头部并防止它。的渗出和钙离子的流入由精子活力和解冻比对照组在不PUFA显著更高羊顶体完整率。加上述DHA的两种方式都是单独添加和组合的。然增加多不饱和脂肪酸在一些物种中表现出单精子功能的改进工作中，一些研究显示，联合使用L-半胱氨酸可以显著提高解冻后的精子质量，特别是精子的运动性和完整性。合并的PUFA的使用维生素E直接加入到冷冻保护剂[22]可以使精子更稳定PUFA保护。管如此，最近的研究报道精液参数或添加饮食的n-3多不饱和脂肪酸和n-6 [17〜21.23]，这是类似这项研究的结果后，新鲜冰冻没有任何改善。
理相关文献后，发现出现这种差异的原因可能是DHA起着重要的作用相对于种类，以及加入的方式可起到根据品种不同的角色并且还可以与PUFA的类型和纯度相关。前，N-3 PUFA在人类精子的影响研究，密切相关的精子的生理机能处于起步阶段。这项研究中，只有DHA（N-3 PUFA 1）的影响，加入到对人类精子的运动参数人体冷冻保护剂进行了检查，而在正常人和不育，单独的DHA或N-3 PUFA已被添加。在研究的研究上的冷冻精子的抗氧化剂的作用，并通过这些研究，N-3 PUFA DHA的人类精子冷冻保存代表的作用将得到更好的理解。[参考文献] [1] Ferramosca甲莫斯卡泰利N，M狄贾科莫等人，膳食脂肪酸影响质量和精子功能[J]。科学，2017，5（3）：423-430。
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