使用橡胶种子油作为原料，并通过冷冻将脂肪酸皂化以获得脂肪酸I.通过低温结晶过程建立最佳条件，以将α-亚麻酸响应表面与纯双橡胶溶剂分离。于单因素实验，乙腈和丙酮/脂肪酸I（V / M），乙腈/丙酮（体积/体积），冷冻时间三个因素，使用中心组合实验设计进行了研究这三个因素之间的相互作用。验数据用réponse.Les面法分析的结果表明：乙腈和丙酮混合溶剂，乙腈和丙酮/脂肪酸I（V / M）为18 ：1和乙腈/丙酮（v / v）1.5：1。
　　于9小时，固液分离方法是-18℃和7000rpm，持续3分钟。胶种子油中的α-亚麻酸含量达到45.41％。传统工艺相比，该工艺净化效率高，脂肪酸氧化率低，为α-亚麻酸提纯提供了新的工艺。

　　胶籽油;双溶剂二次冷冻结晶法; α-亚麻酸; α亚麻酸纯化（18：3N-3）属于ω-3系列的多烯脂肪酸，人体组织的细胞的主要成分，身体不能合成。陈代谢，转化可以获得必需的活性物质DHA和EPA [1]。α-亚麻酸不仅降低血脂，血压，血糖，抑制癌症和转移的发生，抑制过敏反应，抑制老化，抗炎，提高了存储器，并且还可以是用于治疗和预防心脑血管和脑血管性痴呆[2]。此，天然α-亚麻酸的开发和使用为医学应用提供了广阔的前景。然溶剂变化对冷冻结晶的效果是明显的，几个人通过冻结上produit.A本文纯度研究结晶的数量的效果公开了α亚麻酸（ ALA）通过冷冻增加结晶次数。

　　冷冻结晶过程中，乙腈/丙酮，乙腈和丙酮/脂肪酸I对二次分离的影响进行了改进，通过分析响应面得到了最佳方法。
　　件材料与方法材料与仪器橡胶油：通过有机溶剂萃取从橡胶种子中提取;脂肪酸I：通过冷结晶预处理混合脂肪酸得到的产物，脂肪酸II：通过冷冻双结晶结晶得到的产物;脂肪酸III：二次通过双溶剂冷冻结晶过程得到的产物;在国家层面分析和纯化丙酮和乙腈等试剂。子秤：EL303（0.001g），梅特勒 - 托利多仪器（上海）有限公司;旋转蒸发器：RE-52系列，上海亚荣生化仪器厂; pH计：PHS-3C，冷库安装精密科学仪器有限公司上海高速冷冻离心机：通用设备型号32R，海蒂诗，德国;超低温冰箱：Thermo Electron Corporation; Agilent 7890A GC：美国安捷伦。合脂肪酸的制备通过皂化制备混合脂肪酸（FFA）。肪酸I的制备通过冷冻结晶制备脂肪酸I.脂肪酸II的制备通过用两种溶剂冷冻结晶制备脂肪酸II。验结果和分析的单因素实验是在乙腈和丙酮溶剂脂肪酸/ I（V / M），乙腈/丙酮（体积/体积）和冷冻时间的效果上的速度进行α-亚麻酸的纯化。定最佳提取条件。油酸含量和油酸减小时的溶剂的量增加，和α亚麻酸的含量增加时的溶剂的量增加。乙腈和丙酮溶剂脂肪酸/ I（V / M）等于20：1时，达到最大和亚油酸含量和油酸是最低的。乙腈和丙酮溶剂连续地增加，乙腈的量在-75℃下凝固，晶体逐渐增加，并且将母液容易包裹在晶体的孔的结构，这使得难以完全分离母液和晶体，以及α-亚麻酸的含量。此，溶剂丙酮乙腈/脂肪酸I（V / M）的最佳比例为20：1乙腈/丙酮比（V / V）设定为1.5：1和冷冻时间上午10点研究了不同溶剂乙腈和丙酮溶剂/脂肪酸I（v / m）对分离效果的影响。油酸和油酸含量逐渐下降。α-亚麻酸的含量随着溶剂用量的增加而增加。溶剂/脂肪酸乙腈丙酮和I（V / m）为等于20：1，亚油酸的纯度最大化，被最小化的亚油酸含量和油酸。乙腈和丙酮溶剂的增加，乙腈固化的在-​​75℃下量，晶体逐渐增加时，母液容易包裹在晶体的孔的结构，这使得难以完全分离母液和晶体，冷库安装α-亚麻酸含量降低。应面使用设计专家软件来调整表2的由多重回归的数据的回归模型的响应面方法实验设计设计中，获得相应的模型：Y = 45，20-1，55X1 -1，17X2-0，086X3-1，67X1X2-1，05X1X3 2，43X2X3-1，68X12-5，75X22-3.61X32Y是α亚麻酸含量，％; X1是乙腈和丙酮/脂肪酸I; X2是乙腈/丙酮; X3是冻结时间，h。于α亚麻酸的验证试验中的最好的分离条件为：乙腈和丙酮/脂肪酸我是17.68：1（V / M），乙腈/丙酮为1.49（v / v），冷冻时间为9.05小时，酸含量为45.57％。
　　于α亚麻酸和丙酮橡胶油和丙酮的分离的最佳条件/ I脂肪酸为18：1（V / m）的乙腈/的，丙酮为1.5：1（v / v），冷冻时间为9小时。条件下进行三组平行试验和α-亚麻酸的平均值为45.41％，或理论值，更好地反映了最佳条件的0.16％通过二次冷冻和结晶分离橡胶种子油的处理。
　　果和讨论通过分离和纯化的各种技术分离和纯化之前和之后的橡胶种子油的相对脂肪酸含量是用来分析的不同产品的脂肪酸的相对脂肪酸含量，以及从橡胶种子油中分离α-亚麻酸的纯化和分离方法。验表明，混合脂肪酸油被冻结和结晶，并在饱和脂肪酸是从根本上不饱和脂肪酸的éliminé.La总含量的予脂肪酸是98.67％，这允许预浓缩。

　　过不同分离方法获得的脂肪酸产物具有不同的分离和纯化效果。α亚麻酸的含量的观点出发，每双二次溶剂冷冻结晶的方法是最好的，结晶的采用双溶剂冻结的方法是第二和冷冻结晶方法具有效果最差分析。此，可以理解的是，类型和原料的量和溶剂的冷冻结晶和结晶的数量具有由α亚麻酸的冷冻结晶上分离的效果有很大的影响。

　　胶种子油处理过的样品中的α-亚麻酸的产率通过结晶的方法纯化通过在两种溶剂和结晶通过在两个次级溶剂冷冻方法冷冻，虽然纯度产物中的α-亚麻酸为31.52％至45.41％。而，α亚麻酸样品的产率相对较低，在10％至只有20％的范围内，这表明α亚麻酸橡胶籽油更失去分离和纯化过程。

　　
　　了提高α亚麻酸样品的产率时，建议的是，分离残留物在生产过程中冻结的二次分离和纯化。过双溶剂冷冻结晶法获得的产物收率低，并且通过冷冻结晶法得到的脂肪酸I的收率为68.49％[18]。此，通过冷冻结晶法纯化的原料用作双溶剂二次结晶的原料。
　　论在油料种子橡胶的α亚麻酸在分离和纯化的双二次冷冻solvent.The过程分离精制，结晶通过单因素实验和优化设计实验Box-Behnken和响应面分析。乙腈和丙酮混合溶剂，乙腈和丙酮/脂肪酸I（V / M）为18：1乙腈/丙酮（体积/体积）为1.5：1，冷冻时间为9h，固液分离方法为-18℃，7000rpm离心3min。这些条件下，橡胶种子油的α-亚麻酸含量为45.41％。不同的橡胶冷冻晶体的油的α亚麻酸的分离的效果进行了研究：我们发现的α亚麻酸在基于脂肪酸的产品的顺序脂肪酸III>脂肪酸II>脂肪酸I，表明通过二次冷冻和结晶分离橡胶种子油。果最好。助项目：国家自然科学基金（国家基金）;海南大学中西部高校高等教育振兴规划。
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