香草是一个爬行藤生动兰科其中，发酵后，使得各种芳香成分和成为一个重要的芳族材料。而，常规发酵具有长的香味持续时间和芳族组分的低转化率。实验研究了冷冻溶解与不同外源酶处理对香草豆荚香气主要成分的影响。果表明，外源酶不仅可以增加香兰素的含量，而且还增加了前体物质的转化率，glucurosaldéhyde。此基础上，相对于空白样品，由整体溶液冷冻用香兰素香兰素外源酶处理，香草醛，对羟基苯甲酸和香草酸结合后的显著增加纤维素酶。草醛含量，对羟基苯甲醛，对 - 羟基与盖拉西厄斯-β葡糖苷酶处理后的酸和香草酸为5.660％，冷库安装分别0.089％，0.069％和0.101％，与传统的发酵和公共外部源相比。处理，全部由溶解的新鲜香草豆荚的外源酶处理有关的反应冷冻显著增加了香草醛含量（P <0.05），而纤维素酶的果胶酶，β葡糖苷酶，果胶酶-β葡糖苷酶，纤维素酶β葡糖苷酶，纤维素酶，果胶酶，果胶酶显著增加对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸（p <0.05）的含量。草蓝;溶解凝胶;外源酶;的调味剂CLC数TS255.2文献识别码的关键部件具有冻融与各种外源性酶上的香草豆fraîchesZHANGYanjun1，2，XU飞1，2，SE的主要芳香成分组合的作用Shuzhen1，2 TAN Lehe1，2 *香料研究所和饮料，热科院，万宁，海南571533，中国国家大剧院工程研究和技术主要热带作物，万宁，海南571533，抽象的属于ChineVanille兰科植物是一种多年生植物。萄藤在发酵后会产生各种芳香成分。草的传统硬化过程导致长的发酵时间和芳族组分的低转化率。研究冻融对新鲜的香草豆的芳香成分不同外源酶相结合的效果：结果表明，外源酶不仅可以提高香兰素的含量，同时也提高了转化率它的蛋白质。外，相比于空白样品所有的实施例表现出香草醛，对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸的冻融具有不同治疗组合之后基于一个显著增加外源酶。品质内容香草醛，对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和酸5.660％香草，0.089％，0.069％和纤维素果胶酶-β糖苷酶处理后的0.089％ - 相对于传统的发酵处理和到外源酶，测试结果表明在冷冻 - 解冻结合果胶酶纤维素-β糖苷酶，果胶酶在对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸一显著增加-β-糖苷酶处理，纤维素-β糖苷酶，果胶酶，纤维素，果胶酶（p <0.05）关键词：香草;冻融;外源酶; Arommedoi 10.3969 / j的主要组成部分。Issn.1000-2561.2015.12.026香荚兰安德鲁斯，又名香草，香草和兰花香是一种多年生藤本植物热带兰花兰科植物。草是农业食品，饮料，化妆品和卷烟工业中最重要和最芳香的成分[1]。草也是兰花家族中唯一可用作商业重要味道成分的成分。
　　达且成熟的香草豆豆荚被称为香草豌豆，新鲜的豆荚只是草。草兰的传统发酵过程包括销毁过程，发酵，干燥和老化，最后是一个复杂的香气成分，包括烷烃，醇，醛和酮的形成，酯类，酚类，酸类，少量苯，醚类等[2-3]。图1所示，由发酵香草蓝色产生的香气的主要成分是香草醛，香草酸，对羟基苯甲醛和对羟基苯甲酸[2]。近的研究表明，新鲜的香草豆荚蓝色香气的主要成分甙的含量为15％和20％之间，而传统的发酵生香的转化率是2％和3％之间[3-4]。前，香草兰的传统发酵技术已经比较成熟，但发酵时间长，香味的主要成分的转化率是微弱的。关于发酵香草豆荚或外源酶的新鲜丁香治疗许多报道，但都集中在香兰素的含量增加的研究。Odoux的研究[3]，安萨尔迪[5]已经表明，冷冻和解冻破坏细胞壁的完整性，并在香草香草醛含量增加。毛和ZUCCA [6]表明，添加果胶酶和β葡糖苷酶发酵香草豆荚的增加显著香兰素内容。Gu等人[7]研究了在添加纤维素酶的影响，温度和加热时间对从香草兰香兰素的提取和显示，香兰素提取率在最佳条件下达到7.62mg / g。Brunerie [8]研究了外源性添加纤维素酶，果胶酶和β葡糖苷酶的以显著增加香兰素的内容。Ovando等。[9]使用纤维素酶预处理新鲜的香草豆荚，以提高香草醛释放速率。伊斯 - 特兰等人[10]使用由一个复杂的酶戊聚糖和纤维素的两个步骤的过程来提高兰花香草3.13倍的香草醛含量。Waliszewski等人[11]使用两种纤维素酶制剂预处理两次在切碎豆类香草香兰素内容。
　　Naidu等。[12]使用茶酶或戊聚糖复合物从新鲜的香草豆荚中提取香草醛，其含量达到4.2％。雷拉和欧文[13]表明，添加果胶酶，纤维素酶和β葡糖苷酶的所述机械加工和冷冻保存导致的7％香草醛含量。管对前处理或外源添加的香草香草提取酶的影响报道很多，有外源性酶上的作用没有报告除香草醛外，香气的主要成分。我们的研究开始时，我们的小组发现，外源添加纤维素酶和果胶酶的新鲜豆荚香草的治疗可以显著提高香兰素提取率[14-15]。验，因此，应用外源酶的方法（果胶酶，纤维素酶，β葡糖苷酶，和复合酶戊聚糖酶）的蓝色香草豆荚处理相比，外源酶和酶复合物之间的差异仅搜索根据成本的主要风味成分含量最高的香草提取工艺为香草的深加工和质量控制提供了参考。料与方法植物和测试药物已成熟与豌豆荚香草微微泛黄，在fond.En 2014年11月不开裂，它收集在香草醛的背景，香草酸，对羟基苯甲醛和对羟基苯甲酸。

　　产品购自Sigma;纤维素酶（15000 U /克）从国药化学试剂有限公司，果胶酶（30 000 U / g）的购买从Aladdin试剂购; β-葡萄糖苷酶（9，300）。U / g）购自sigma公司;一个复杂的酶戊聚糖（100 FBG /克）从Novozymes有限公司，无水乙醇和冰醋酸（所有分析级）购自实验化工厂津天大购得。器设备150HL250HL恒温恒湿干燥箱（上海一恒科学仪器公司）; RT5高温多点磁力搅拌器（IKA，德国）; Agilent 1260高效液相色谱（Agilent，USA）;的Milli-Q超纯水（Millipore公司，USA）超声波清洗器KQ-600B（昆山超声仪器有限公司），电缆提取器（耀玻璃仪器有限公司）。法水分的测定按GB / T 5009.3-2003测定。统的发酵方法已经根据其他Dignum和已部分修饰的[2]：新鲜香草豆荚级500克在70℃下播种首次1.5分钟，在在恒温恒湿室中相对湿度为95％，在60℃下相对湿度为3小时。50℃下出汗3小时后，汗液3小时在45℃和18℃至18℃时，新鲜豆豆和发酵豆的水分含量进行测定86.19％和15.20％。据Zhang等人的方法对粉末状香草蓝粉末进行索氏提取。[15]，并将所提取的溶液进行检测在液相高性能glucurosaldéhyde，香草醛，对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸。冻溶解处理根据Perera等人的方法改进冷冻溶解处理方法。[13]：新鲜荚果第一类香草豆荚被包装在5真空的袋子，并在非常低的温度在-40℃置于冰箱中24个小时至37小时。解在℃中，处理过的豆荚称为冷冻溶解豆荚。据Mo Limei等人的方法，部分修饰外源酶处理方法。[14]，张等人。[15]，并精确称量200.0克蓝色香草豆荚第一类和香草豆荚通过冷冻溶解，重量比1：1的水打，的pH后跳动为5.4液体香草，平均分为20份，每份20克，加入纤维素酶，果胶酶，β葡糖苷酶，戊聚糖酶和复杂简单在指定温度的酶复合物组成的使用酶。相同条件下，使用20g香草蓝浆作为对照。水解8小时后，将酶在沸水浴中温育10分钟。旦冷却滤液，无水乙醇加入到获得的绝对乙醇的体积分数为47.5％，和醇，在室温下进行30分钟提取，然后过滤，得到香兰素的提取物和进行高效液相检测以计算香草醛 - 葡萄糖。草醛，对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸。
　　据Naidu方法，不同处理的香草豆荚中香气的主要成分略有改变[12]。味用液相色谱高性能安捷伦1260与反相柱的Agilent ZORBAX XDB-C18（5微米，4.6）检测到。米×150mm）上，该柱温度设定在30℃下，在流动相中的乙腈和水的体积比，以1.0毫升/分钟流速：的所有的标准产品的浓度分别是20和40对于解决方案，在60，80，100和120微克/毫升，注射量设定为5微升，并且每个样品注射3次，所述UV检测波长设定为280nm，灵敏度设定为0.01AUFS。机器上分析之前，样品在0.45μm膜上运行。谱峰和相应的标准浓度的积分面积的积分的标准曲线作图，并计算在香草豆荚调味的主要成分，根据标准曲线和含量均匀以干物质含量（％）表示。据分析使用SPSS 12.0.1来计算平均值，冷库安装标准偏差和每一数据组的显著差别，显著差异是95％（至少显著差异的方法中，P <0， 05），重复所有测试结果。3次。新鲜豆荚到vanille.La葡糖胺和香草醛的香气的主成分的外源酶处理的效果的结果和分析在图2中呈现的新鲜荚果香兰素内容的前体与香草是-1.38。％，香草醛含量为0.21％。任何外源性酶处理的蓝色香草香草醛的含量与纤维素酶，果胶酶-β糖苷酶处理后显著上升至4.68％。兰素，从顶部到底部，包含：纤维素酶的β葡糖苷酶复合物纤维素酶pentanose，果胶酶，β葡糖苷酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，果胶酶，果胶酶复合酶戊聚糖纤维素酶处理时，内容在对应的香草醛3.78％，3.59％，3.34％，3.21％，3.05％，2.36％，2.26％，1.68％，相应于前体的含量在葡糖胺物质分别为4.01％，4.34％，4.92％，5.19％，5.52％，6.94％，7.15％和8.35％。比的香草醛1.98％常规发酵产率，除了与果胶酶处理，另一外源酶处理增加了香草醛含量。统的转化率荚香兰素新鲜豆和新鲜豆35％和4％，分别，纤维素酶，果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，β葡糖苷酶，复合纤维素酶pentanose的酶，费率与果胶酶-β葡糖苷酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，果胶酶处理后变换香兰素，所述酶复合物戊聚糖，纤维素酶和果胶酶分别为71％和66％。63％，58％，56％，53％，41％，39％，29％。对于传统的发酵，所述外源酶纤维素酶果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，β葡糖苷酶，纤维素酶复合物pentanose，果胶酶-β - 葡萄糖苷酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，果胶酶，复戊聚糖，纤维素酶增加的36％，31％，28％，23％，21％，18％，6％，4％香草醛的转化率。3显示对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸。羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸在新鲜香草豆荚的含量是太弱而被检测到。羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸的丁香豆荚传统发酵香草含量分别为0.022％，0.023％和0.050％。

　　维素酶 - 果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，β葡糖苷酶，纤维素酶复合物pentanose，果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，果胶对羟基苯甲醛的内容，对 - 羟基苯甲酸和香草酸处理后用酶，的β葡糖苷酶，所述酶复合物戊聚糖，纤维素酶和果胶酶分别为0.049％，0.041％和0.072％，0.041％。0.037％和0.067％，0.038％，0.034％和0.066％，0.036％，0.031％和0.051％，0.031％，0.029％和0.060％，0.029％和0.060％，0.025％，0.025％，0.025％和0.05％ ，0.027％，0.024％和0.053％，0.024％，0.016％和0.058％。对于传统的发酵，用在香草对羟基苯甲酸含量用果胶酶，对羟基苯甲醛的含量，对羟基苯甲酸和香草酸在荚果处理后的例外用外源性处理后香草酶对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸的含量与纤维素酶果胶酶-β葡糖苷酶（0.027％，0.018％和0.022％，p处理后最显著增加<0.05）。源酶处理冷冻溶出对主要香气的影响。鲜豆荚香草的部件在图4中示出在新鲜荚果用新鲜香草在香草醛的前体的含量为：11.38％和香草醛的含量为0.21％后冷冻溶解处理，香草醛含量为10.21％，香草醛含量为0.67％。白对照的香草醛含量为9.79％，香草醛含量为0.98％。比于空白样品，在蓝色的香草香草醛含量显著完全溶解后，用外源性酶处理冷冻结合增加，纤维素酶，果胶酶-β糖苷酶处理后的5.66％。胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，果胶酶，果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶含有香兰素。- 复合酶戊聚糖，戊聚糖复合酶，纤维素酶处理，5.42％，5.11％，5.01％，4.96％，4.61％，3.98％，3对应香兰素内容，22％，2.98％，相应的前体材料的葡糖胺含量分别为0.62％，1.26％，1.47％，1.57％，2.27％，3.59％ ，5.17％和5.66％。比，1.98％传统发酵香草醛含量，所有通过溶解冷冻的新鲜豆荚香草外源酶处理相结合显著增加了香草醛含量（P <0.05）。统的发酵速率和在白色基香兰素转化分别为35％和17％，纤维素酶，果胶酶，β葡糖苷酶，果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，果胶酶，果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶复合物pentanose，戊聚糖酶复合物，用纤维素酶处理，为98％，分别为94％，89％，87％，86％，81％，70％，56％香草醛的转化率， 52％。有芳香物质组合冷冻的传统发酵通过溶解与外源纤维素酶，果胶酶，β葡糖苷酶，果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，β葡糖苷酶相比，纤维素果胶酶，果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶-pentanose complexase，戊聚糖complexase和纤维素酶分别增加63％，59％和54香草醛的转化率。％，52％，51％，46％，35％，21％，17％。图4中所示，相比于通过冷冻，溶解通过合并溶解 - 凝胶用外源纤维素酶，果胶酶，β葡糖苷酶，果胶酶，β葡糖苷酶，纤维处理通过酶-β-不溶解后的外源酶处理葡糖苷酶，纤维素酶，果胶酶，果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶pentanose complexase，戊聚糖complexase，纤维素酶，以增加所述香兰γ含量为2.93％，2.08，1.96％，1.75％， 1.33％，1.26％，0.98％，0.72％，0.39％和香草醛的转化率分别是23增加了52％，46％，34％，30％，％，17％，15％，13％，7％。5显示对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸。
　　羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸在新鲜香草豆荚的含量是太弱而被检测到。羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和在传统的发酵香草豆荚和对照对照组香草酸的含量分别为0.022％，0.023％和0.050％，0.024％，0.011％和0.038％。胶溶解用外源纤维素酶，果胶酶，β葡糖苷酶，果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，果胶酶，水果对羟基苯甲醛的内容，对 - 羟基苯甲酸和香草酸相关联的果胶酶，β葡糖苷酶，纤维素酶复合物pentanose后，戊聚糖复合酶和纤维素酶处理分别为0.089％和0.069％。0.101％，0.053％，0.042％和0.083％，0.076％，0.046％和0.072％，0.039％，0.039％和0.067％，0.046％，0.034％和0.068％，0.048％，0.025％和0.059％，0.041 %%，0.042％和0.064％，0.029％，0.032％和0.061％，0.030％，0.027％和0.056％。对于传统的发酵，对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸的含量溶解冷冻用外源酶处理组合之后增加，并且纤维素酶，果胶酶中，加入β葡糖苷酶。羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸的含量处理（0.067％，0.046％和0.051％，P <0.05）增加后最显著。图5中所示，溶解的冷冻具有复杂的外源纤维素酶pentanose，一个复杂的酶戊聚糖和纤维素酶组合相比，在处理蓝色香草通过外源酶不溶解冷冻他是在所述内容羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸，但纤维素酶，果胶酶，β葡糖苷酶，果胶酶，β葡糖苷酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，纤维素酶，果胶酶和果胶酶无显著效果显著增加对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸（p <0.05）的含量，并增加分别是0.04％，0.028％和0.029％，0.018％。0.011％和0.032％，0.035％，0.009％和0.005％，0.008％，0.010％和0.007％，0.017％，0.008％和0.014％。β葡糖苷酶对的对羟基苯甲酸含量（P <0.05）一个显著效果和增加至0.009％，但没有关于对羟基苯甲醛和香草酸的含量显著效果。论和结论Odoux [4]，新鲜香草豆荚蓝色香气成分主要包含糖苷底物，主要风味组分是香草醛，它是由前体物质，葡糖胺生产。源性β-葡糖苷酶通过水解产生。Ranadive [16]此外香草醛，它在香草口味起重要作用，也有对羟基苯甲醛和对 - 羟基酸，其存在于两者葡萄糖苷的形式，这是香草的四种成分。被称为香气的主要成分。据测试结果，已知外源性纤维素酶，果胶酶，β葡糖苷酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，纤维素酶复合物pentanose，果进行了比较，常规发酵方法。胶-β葡糖苷酶，β葡糖苷酶，纤维素酶，果胶酶，复杂的戊聚糖和纤维素酶处理费豆荚香草都大大增加了香兰素的含量。伊斯 - 特兰等人[10]表明，与复杂的酶戊聚糖和纤维素的香草新鲜荚果治疗分别得到2.45％和香草醛2.70％，这类似于2.36在本文中获得％和2.26％。雷拉和欧文[13]表明，果胶酶，纤维素酶，β葡糖苷酶和纤维素酶，果胶酶蓝色香草豆荚的治疗，β葡糖苷酶得到的1.4％相应的产率，3.7％和4％。％和7％香草醛。这个实验中，香草的新鲜豆荚香兰素含量治疗果胶酶，纤维素酶和β糖苷酶为1.68％，分别为2.26和3.21％。Ruiz-Terán等人的结果不同。[10]是由于不同endroits.En使用香草豆荚超过起源，气候的地方，生长条件也能影响香兰素的含量。Naidu等。[12]使用的戊聚糖复合酶提取香兰素新鲜香草豆荚，其对应于2.59％，这类似于由在该实验中，酶处理戊聚糖复合物获得的结果。外源酶的基础上，使用通过与外源酶冷冻合并溶解治疗新鲜豆荚vanille.Les的结果表明，溶解冷冻相关联的治疗用外源酶豆荚新鲜香草可以显著提高的转化率和在香草醛对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸的含量的增加显著内容。可能是由于新鲜香草豆荚的细胞完好无损。

　　于果胶和纤维素的分离，常见的外源酶不与底物完全接触。冻后，细胞壁被破坏，果胶酶和纤维素酶。解果胶和纤维素允许β葡糖苷酶为足够与基板以增加香兰素内容物接触。雷拉和欧文[13]表明，果胶酶，纤维素酶，β葡糖苷酶组合在新鲜香草胶囊的联合治疗给香兰素的7％。这个测试中，用果胶酶，纤维素酶，β葡糖苷酶新鲜的香草豆荚联合治疗和溶解冷了香兰素的5.66％。不同的是由于使用汤加豆荚，含香兰素的15％以上，完全转化后能产生超过7.2％香草醛。实验中使用的吊舱是海南，其中葡萄牙人占11.8％。兰素糖在完全转化后产生5.72％的香草醛。Naidu等。[12]用于在新鲜的香草豆荚提取香草醛的酶茶，占4.2％，这类似于通过用纤维素酶果胶酶-β-处理所获得的结果本实验中的葡糖苷酶。Odoux等人[4]表明细胞壁的完整性通过冷冻/解冻键合并与内源性β葡糖苷酶，这给了香草醛2.3％治疗破坏。Waliszewski等人[11]从使用切香草3纤维素酶制剂中的段香兰素的内容。Ranadive [16]表明，外源添加β葡糖苷酶的增加对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸的死亡后的内容（22.5‰，2.8，8.9）丁香的新鲜豆蓝香草。Ranadive的结果进行比较[16]，本实验中使用通过用外源酶处理，以获得对羟基苯甲醛，对羟基苯甲酸和香草酸含量较高的溶解组合的溶液。

　　可能是由于这样的事实，灭菌通过瞬时微波破坏细胞的完整性，但没有凝胶溶解来破坏在该实验中蓝色香草细胞的数目。然添加的β葡糖苷酶，一些细胞不被破坏，即使细胞壁的破坏，仍然存在的物质，例如果胶和纤维素以分离β葡糖苷酶和底物，并添加果胶酶，纤维素酶或在该实验中它们的混合物显著增加对羟基苯甲醛，对 - 羟基苯甲酸和香水。酸含量。
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