使用多因素测试方法研究了三个因素，包括预冷冻时间，真空干燥时间和烟草花粉冷冻前的防冻剂。果表明，三种因素均对花粉干燥有显着影响，对花粉活力和授粉后果实影响不大，真空干燥是影响花粉干燥的主要因素。相互预冻时间和真空干燥时间。果更大。草花粉被认为是冷冻干燥的，预冷冻时间为2至3小时，抽吸时间约为12小时。常，不添加防冻剂。草花粉;冷冻干燥;失去水中的分散;花粉活力;率固定果分类号：S572.03商品编号：1007-5119（2015）02-0038-05DOI：对花粉的冷冻干燥10.13496 / j.issn.1007-5119.2015.02.007Abstract多因素的试验方法研究了烟草，花粉预冻时间，真空干燥时间以及预冷前加入防冻剂的效果。果表明，冷库安装影响花粉干燥，活力和授粉的三个重要因素。
　　空干燥时间是影响花粉的主要因素，预凝胶时间和真空干燥时间有很大的相互作用。冻干燥烟草花粉不添加防冻剂，预冷冻时间的2〜3小时，提取时间关键12h.Mots：烟草花粉，冷冻干燥，失水率，花粉活力，结实率与烟草业的不断发展，不育男性烟草杂交种的推广逐渐成为烟草生产的主导原则[1-4]。年来，随着中等花粉和烟草杂交授粉等新技术的开发和应用[5-6]，花粉贮藏已成为杂交种子生产过程中的重要生产环节。影响储存花粉活力和寿命的众多因素中，储存温度和相对湿度是主要因素[7]。此，旨在提高储存花粉生存能力的研究主要集中在改善储存条件，如硅胶干燥储存，低温储存，极低温储存，等等[8-14]。干技术的原理是让材料的水分完全冻结，然后在一定的真空条件下在低温下升华冷冻晶体，从而达到脱水的目的。实用新型具有以下优点：干燥彻底，可控制含水量95％~99％，材料有效成分损失低，材料形状和生理功能迅速。水化后回收，贮存条件不严格，可在室温下长期贮存。技术现已广泛应用于生物制剂的保护，药品，文物保护，食品加工等方面[15-16]。兴石等。[17]研究了大白菜和泡桐花粉，并得出结论，冷冻干燥的花粉在室温下仍然具有30至45天的高活力。前，很少报道使用冷冻干燥技术来储存烟草花粉。研究的目的是通过测试冷冻干燥时间，真空干燥时间和加入冷冻保护剂，为杂交烟草种子生产过程中花粉的大规模储存提供方法和依据。料与方法白肋烟B37花粉试验设备。试验方法是在基本再生中国烟草恩施从5进行到7月15日和花粉白肋烟B37物收集，放置在具有硅胶，密封的干燥器和置于冷冻在低温下供以后使用。7月20日，21日和22日，样品首先在处理前测试水分含量，然后冷冻干燥，取样并分析水分含量和花粉活性。月23日，前后冷冻干燥（对照）和处理过的花粉进行田间授粉试验，7月30日授粉后7天研究田间定植率。试设计使用L9（34）3因子正交测试表设计。子A：预冻时间;因素B：吸气时间;因子C：加入防冻剂。复3次，共处理27次，每次处理花粉4g。因子的水平控制和试验处理的设计如表1所示。用北京博益康制造的FD-1A-50冷冻干燥机将冷冻的预冷冻和干燥方法冻干。粉首先在冷冻室的冷阱中预冷冻，温度为-50至-55℃，经过预定时间后，均匀分布在冷冻干燥机材料箱内进行真空干燥。粉厚度<10 mm，温度在-45到-50°C之间，大气压力稳定在8到10 Pa之间。分检测和水分散失水计算分析仪MA150红外水分检测冻干处理前后花粉的含水量，每次重复4次，每次0.5克花粉。
　　算水的分散损失率。方：花粉水分散体损失率/％= [（处理后的水 - 处理前的水分）/处理前的水分]×100％。过体外发芽培养测量花粉活力以检测花粉活力。养基由葡萄糖3毫克 硼酸50毫克 氯化钙20毫克 1000毫升水组成[18]。温室的温度为28℃，培养时间为2小时。粉萌发率的显微统计。微观尺度上测量花粉管的长度：花粉管的长度是花粉粒的长度的两倍，并且有效颗粒的数量重复4次。粉发芽率/％=有效发芽数/花粉粒总数×100％[10]。交田授粉和结果率统计将冷冻干燥的花粉在生物培养箱中在25-28°C和95％相对湿度下再水化0.5小时[17]，然后与MSB21杂交每次处理5株。几次，7天后，计算授粉率并取加权平均值。果套装百分比％=绿色水果数/花粉花数×100％。果不同处理对水分散损失的影响花粉含水量是贮藏时间和花粉活力的决定因素之一。冻干燥的目的是利用冷冻干燥原理尽可能地去除花粉水，抑制酶的活性，延长花粉的寿命。该试验中，A，B和C三种因素和水分散损失因子的相互作用达到了极高的水平。子B是影响水的主要因素，其次是因子A，因子C具有最小的影响。A因子中，冷库安装花粉水分散率随着冻结前时间的增加而增加，因子A3（4 h）显着高于因子A1（2 h）;因子B随着撤离时间的增加而显着增加。升趋势，B3（12 h）> B2（8 h）> B1（4 h），差异对于因子相互作用因子的进一步分析具有极其重要的意义。同水平的因子A，因子B和C在水中的分散消失。率差异较小，随着预冻时间的延长，水分散失去的趋势增加：在相同的因子A水平下，因子B和因子C的水平之间的差异是伟大的，差异非常显着。此，在相同的因子A下，因子B是水分散失去的主要因素，其影响大于因子C的影响。多细节见表3。不同B因子水平下，因子A和C的水分散率分别为34.26％~98.10％和38.20％~97.90％，表明该因素B是水分散损失的主要因素;因子B是相同的水平，因子A和C因子的水分散率的差异相对较小。不同水平的因子C中，因子B之间的水分散差异大于因子A的水分散差异。中，不同因子B水平的水分散率差异明显更大。重要的。同处理对花粉活力的影响花粉活力方差分析结果未达到显着水平，但因子A与因子B和C之间的相互作用达到显着水平。同水平的各种因子之间花粉活力的显着差异的结果如表4所示.B3花粉的活力（12小时）显着高于B1（4小时），但差异很大。种因子A和C之间的花粉活力没有达到显着水平。表明抽吸时间对花粉的活力有一定影响。处理间花粉活力相互作用的分析结果表明，不同因子A水平下因子B之间花粉活力的差异大于因子C的差异。中，活力A1（2h）中因子B和C的花粉呈下降趋势，A2（3h）和A3（4h）呈上升趋势。不同水平的B因子中，因子A水平之间的花粉活力差异大于因子C的水平。中，因子A的花粉活力在B1和B2中降低，在B3中增加，其中因子C水平之间的花粉活力不是显着水平。同C因子水平下因子A和B水平的花粉活力无显着差异，因子和水平差异分析结果见表5。同处理中坐果率的比较讨论一般预冷期的持续时间与产品的共晶点，预冻温度和冷冻速率有关[15-16，19]。报道，大多数培养组织的共晶点在-20至-40℃之间，预冷温度低于共晶点5至20℃，预冻时间为冷冻通常为2-4小时[15，19-21]。测试的结果基本上与此一致。草花粉的共晶点，预冻温度，冷冻速率和花粉密度等参数以及单位面积花粉厚度与预冻时间的关系应为深度。

　　空干燥采用低温低压传质和传热原理，直接将冰升华为水蒸气，然后用水蒸气冷凝器冷凝水蒸气。空系统，以获得干燥的产品。附时间和干燥效果与升华温度，升华速率，加热方式，真空度和材料厚度有关。这项研究中，花粉的厚度小于1厘米，升华温度在-45到-50℃之间，气体压力稳定在8到10帕之间，满足升华条件。粉水。吸时间约为12小时，将花粉从97％排除在98％之间。分与先前研究人员研究的水升华速率约为1 mm / h [15-16]的结论一致。预冷冻之前添加防冻剂可以防止由于低温效应，冷冻效果和冷冻干燥过程中的脱水效应而使物体的活性组分变性[16]。了保存角膜等活性生物或生物样品的冻干，保护剂的选择是冻干过程的必要技术[22]。前，冷冻保护剂的作用机理尚不清楚。且有许多类型的保护剂，以及用于不同生物制品的不同保护剂。前，二甲基亚砜（DMSO），甘油，糖和甜醇通常用作冷冻保护剂.DMSO和蔗糖主要用于在极低温度下保存藻类花粉，这对花粉保护有明显的影响。响[23]。这项研究中，冻干前加入防冻剂对花粉的干燥和活力没有明显影响。入再水化的防冻剂后，很容易结块，这是不利于野外人工授粉。这项研究中，只计算冷冻干燥后的花粉活性和授粉后的果实数量，但每种酶的组成，形态，结构和活性都发生了变化。要进一步研究。论可以使用冷冻干燥技术来干燥烟草花粉。
　　确保花粉活力强的借口下，它可以控制花粉中97％至98％的水分，有利于花粉的长期保存。冷冻干燥过程中，预冷温度为-50至-55℃，预冷时间为2至4小时，抽吸时间为约12小时。
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