为了加快在灰飞虱冬虫夏草接种病毒的鉴定，我们所研究的最佳时间冷冻治疗疫籼稻及其对传输效果和灰飞虱的出现。果表明，在-20°C的疫霉菌冷冻处理不会影响叶蝉对水稻条纹病毒的传播，以及冷冻处理对传播能力的影响。飞虱（Laodelphax striatellus）的出现并不明显。冻方法;大米刮病毒;灰叶蝉;中毒;中图分类号：S435.112 .3文献标识码：A文章编号：1002-1302（2015）01-0117-02收稿日期：2014-03-04资助项目：自主创新基金江苏省农业科技[No. CX（12）1003];国家公益（农业）部门特别研究项目（No.江苏省科技支撑计划（BE No.）。者简介：吴淑华（1962-），女，研究员，水稻病毒病研究方向。子邮件：kingplasmid@gmail.com。

　　讯作者：周义军，博士，研究教授，植物病毒病研究方向。子邮件：yjzhou@jaas.ac.cn。斯划痕是由病毒引起的米饭刮（RSV）由灰飞虱[1]传播大米的主要疾病，出现了第一次在日本的关东地区在1897年[1]。中国，该病于1963年首次出现在江苏南部[2]，现已扩散到全国18个省（市，自治区），包括云南，浙江，山东，河南。云南和其他地方。于其盛行，它在20世纪90年代在日本的粳稻种植区盛行，导致水稻产量大幅减少[3]。江苏省，这种疾病在某些水稻种植区普遍在1998年大部分的水稻种植面积的十分普遍，并在2002年扩大2002年，病株率为50％[4] 2004年，该地区受江苏省水稻种植。79％，一些田地没有收获。2005年，感染区继续扩大，并开始向浙江，安徽，河南，山东，上海等周边省份（城市）蔓延，造成重大社会影响[5]。江苏省建湖等地，也发现斑纹条纹病毒对小麦造成损害[6]。2005年以后，江苏省通过推广防治技术和种植抗病品种，逐步减少了水稻病害。而，鉴于病毒性疾病的突然爆发性和单一抗性基因的隐患，不能延迟对新抗性资源的持续探索和抗性品种的选择。抗病资源的发现和新抗病品种的选择需要一种稳定而科学的方法来鉴定接种：周伟建立的水稻稻瘟病鉴定方法al [7]稳定可靠，由条纹稻叶组成。定对火疫病的抗性的优选方法，但是在接种过程中，发现灰飞虱的定量接种由于传递介质的高移动性而成为复杂且繁琐的任务。该实验中，通过冷冻保存幼虫有毒蝎子的治疗进行了研究，其用于治疗致病疫霉的作为综合征大米划伤等提供了新的方法（国家发明专利[8]]），大大加速了蝇蟑螂病毒接种病毒的鉴定，为加速抗病品种鉴定提供技术支持和选择过程。料与方法稻米材料和稻米材料介质药物传递物：武育粳3号敏感品种（由武进稻米马良种子场提供）。飞虱（Laodelphax striatellus）的筛选和饲养：2005年，从江苏省海安县的条纹稻病稻田收集叶蝉若虫，并与幼苗一起在玻璃中生长。育粳苗3号，成熟后。据周一军的方法[9] [9]，单头雌性分别产卵并检测出RSV的存在情况。毒女性的雌性在武育粳3号烧杯中饲养，饲养2只3代。照与上述方法相同的方法，将获得的纯菌株用于2至3代膨胀后的接种试验。测试期间，进行定期测试以使昆虫中毒率保持在80％以上。冻时间梯度被取入6个编号干玻璃杯，每个杯子被定位与100条3岁至5年中毒灰色蚱蜢，一旦密封纱布，它是在冰箱中的温度下冷冻生命 - 20℃迅速释放在白纸上滴蟑螂灰，观察并记录灰稻虱的活性状态之后，报警时间和昆虫数目morts.Après调查，灰稻虱将动物分别保存在1000ml烧杯中，并在第二天计数死亡昆虫的数量。冻灰色叶蝉关于其发送所述吸涨和发芽药物武育粳3号能力的影响种植在250ml的玻璃烧杯中至0.5叶每杯12周的片剂，共6杯。130头有毒灰分，在-20℃冰箱中冷冻20分钟，然后接种武育粳3号1.5片叶子120粒，重复操作3次，服用120粒毒药没有冻结。灰叶蝉用1.5叶的五灵玉3号植物接种，重复3次。璃纱布以在黑暗中48小时后14小时光照/ 10小时光照周期密封并保持在22℃，所有灰度叶蝉被拆除，移植在现场和移植7天后开始调查。查总数乘以15，发病率根据上次调查的结果计算。冻灰色叶蝉其形成羽毛的效果：第四阶段若虫在冰箱中在-20℃下20分钟冷冻，并用苗武育粳＃3，30昆虫转移到250ml玻璃杯每杯。
　　5杯。旦若虫成羽毛，就计算成虫羽毛的数量并计算出苗率。养若虫的水稻植物继续被管理，直到孵化出由冷冻灰叶蝉产生的卵。果和讨论冻结灰色叶蝉的时间冷却至-20℃持续10 min.Il既不昏迷或battement.Il仍然不适合用于计数papier.Cependant，冷冻时间长期影响了灰叶蝉的活力。冻超过40分钟后，死亡率约为17％，死亡率和恢复时间随着冷冻时间而增加（表1）。着恢复时间和死亡率的完成，将有毒粉煤灰在-20°C下冷冻20分钟更为合适。1不同冷冻时间处理后灰飞虱的状态恢复剩余时间的时间灰飞虱死亡率65.冷冻灰飞虱对其中毒能力的影响处理在-20°C下进行20分钟受感染的武育粳3号的发病率略低于没有冷冻灰飞虱的接种水稻，但显着性分析显示两者之间无显着差异（表2）。以看出，冷冻处理对有毒灰叶蝉繁殖水稻叶病毒的能力没有影响。冻治疗5％显着性水平1％高度显著非冷冻冷冻冷冻45.04aA 50.56aA级灰度叶蝉灰飞虱L.平均发病率上其效果羽化的传输容量的表2的影响在-20°C冷冻处理20分钟后，冷库安装灰飞虱的平均出苗率为88.81％，假设试验采用100％未解冻的灰飞虱处理，差异没有显着性，表明冷冻对灰飞虱的出现几乎没有影响（表3）。续观察显示，在-20℃冷冻处理产生的后代出现后，成虫仍然可以产卵和孵化。前已经表明在-20℃下冷冻处理20分钟。灰飞虱交配功能影响不大。
　　-20°C下冷冻20分钟不会影响生命周期。论和结论的鉴定方法在疾病大米划伤的领域和实践是重要的，但性鉴定的结果是对环境条件敏感，导致不均匀的年度和地区的外观灰飞虱及其毒性。在一定程度上影响结果的可重复性[10]。定幼苗接种的方法是在受控条件下鉴定抗性，它可用于评估水稻品种对水稻划痕病的抗性水平，以及克服环境条件的影响和延长识别期。还满足了快速识别大量材料的需要[7]。鉴定过程中，发现药物介导中间体灰飞虱（Laodelphax striatellus）的迁移率很强，使3种凝胶与灰叶蝉的出现有定量关系，从而导致羽毛形成的羽毛总数。

　　蚂蚱已经成为一项复杂而繁琐的工作，对研究的进展产生了一定的影响，因为对冷冻法处理有毒灰叶蝉的研究不仅大大加速了接种水稻病的鉴定。度还为灰蝇蝎病疫苗接种鉴定提供了一种新方法，加快了检测速度和抗病品种选择过程。VRS在-20℃冷冻20分钟后，不仅便于计数，而且对其传输能力和调节作用也很小，并且不影响病毒的传播。稻病。续增加其产卵功能。响不显着，其生命周期不会受到-20°C霜冻20分钟的影响，冷库安装但需要进一步测试以确定生殖和繁殖能力是否受到影响。
　　与刘向东等人一起报道，灰飞虱可以承受一定的温度并承受一定的温度。江苏南部，灰叶蝉在冬季不睡觉，但在-3°C下持续很长时间，出现麻痹现象，若虫冻结。以检索的一些结论[11]基本相同。
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