目的：探讨人体卵子玻璃化的可行性及临床应用价值。法：谁经历了鸡蛋收集的当天鸡蛋的玻璃化从2011年8月至2012年7月6日患者的回顾性分析解冻卵子后进行，卵胞浆内显微注射进行保存复苏，受精和卵子。植后开裂和怀孕。果：6例患者中，52例解冻，31例恢复，恢复率为59.62％。
要原因是蛋的体积相对较大，防止了防冻保护剂有效地穿透细胞，蛋的独特亚细胞结构对低温损伤极为敏感。此，鸡蛋在冷冻/解冻期间对损伤和细胞凋亡非常敏感。[1]随着玻璃化技术的出现，鸡蛋冷冻也带来了新的突破[2，3]。致鸡蛋冻/融的怀孕率增加并接近新鲜周期的循环[4-6]。过这种方式，我们可以使用这项技术来保护生育能力，扩大生育能力，并为接受化放疗，卵巢功能衰竭，盆腔疾病和术前手术的女性提供卵子捐赠[7-9]。外，鸡蛋冷冻可以减轻一些国家胚胎冻结的伦理，法律，道德，宗教和其他方面。此，育种中心也首次尝试对人卵母细胞进行玻璃化，取得了良好的效果。据和方法数据包括2011年8月至2012年7月在我们的生殖中心通过IVF辅助妊娠的6名患者。均年龄为（29.67±4.41）岁。男子在卵子当天取了精子并拒绝提供。疗，在签署知情同意书后，鸡蛋被玻璃化。蛋冷冻将冷冻的鸡蛋 - 冠复合物用透明质酸酶以60IU / mL（SAGE，USA）处理30-40秒以除去颗粒细胞。择成熟的卵母细胞（MII期）进行冷冻。卵用玻璃化冷却试剂盒（北里，Japan）和冷冻液冷冻在室温下分成平衡溶液（ES）和玻璃化溶液（VS）和平衡（25 °C）使用前30分钟。先将鸡蛋放在预热的ES表面上，然后将其置于室温下。蛋会自然流动。
下降过程中，蛋会收缩然后再次膨胀。过程大约需要8到10分钟，然后转移到VS.在VS中，在三个不同的位置重复抽吸，以便尽可能地清洗ES并使VS完全进入细胞，这不能超过60秒。后，将卵洗涤并置于Cryotop茎（KITAZATO，日本）上，尽可能吸出卵周围的剩余液体并迅速引入液氮中。用手动循环进行子宫内膜的制备，以制备患者的子宫内膜。
经的第三天，患者接受2mg / d戊酸雌二醇（Bujiale）口服，定期监测超声B和调整后的额外的音乐根据子宫内膜的状态量。子宫内膜≥8mm并且卵子解冻并且在同一天进行卵胞浆内单精子注射时，开始肌内注射黄体酮。持。冻的卵用解冻试剂盒玻璃化（北里，日本）解冻，解冻液体被分成TS溶液（溶液解冻，解冻溶液），DS（稀释液，冷库安装稀释剂），WS- 1 / WS-2（洗涤溶液1 / - 2）在使用前，在TS 37℃平衡30分钟，其他解冻溶液在室温（25℃）30分钟进行平衡。液氮中取出装满鸡蛋的Cryotop茎，将前端快速浸入TS中，冷库安装在不到一分钟的时间内将卵从Cryotop茎上洗脱下来。后将鸡蛋转移到DS的表面，鸡蛋自然浇铸。个过程持续3分钟，鸡蛋的形态逐渐恢复，但在冷冻前没有恢复到形态。
定妊娠β-HCG的验血胚胎移植后14天的结果，阳性患者继续支持黄体，后14天B超，宫内见孕囊，并击败胎心确定为临床妊娠。果鸡蛋解冻，受精，31例患者中有52例恢复，31例恢复，恢复率为59.62％。31个重症监护卵是ICSI，21个正常受精，共形成20个胚胎，包括2个高质量的胚胎。了一个不可用的胚胎移植病例外，还在另外5个周期中移植了9个胚胎，移植胚胎的平均数量为1.83±0.41。
表1的卵受精ICSI，裂解和怀孕，年龄，解冻，卵数，鸡蛋复苏[N（％）] ICSI，蛋的蛋的数目，受精[N受精后（ ％）]，胚胎，胚胎数，囊胚的数目，胚泡数，冷冻机的数目，冷冻许多，许多诊所妊娠I26106（60.0）66（100.0）50002非妊娠II的数2694（44.4）42（50.0）2000取消了接枝 - III 2686（75.0）64（66.7）642（非妊娠）IV35147（50.0）72（28.6）21002单轮胎V3087 （87.5）76（85.7）61112对VI3531双胞胎（33.3）11（100.0）10001出生胎儿的总2例临床妊娠的有，其中1例在正常分娩的分娩39周，婴儿3.95公斤，正常发育。一例双胞胎仍在怀孕期间。论了通过超排卵技术获得的成熟卵母细胞（MII），其中通过慢分裂纺锤体将染色体排列在赤道板上。为鸡蛋具有低的体积比，所以它在吸收冷冻保护剂和脱水方面效果较差。为不同的是，卵子染色体暴露在细胞质中，不能被核膜保护，核膜很容易破坏DNA和微管。外，外部环境的变化可能导致卵子的单性生殖激活[10]。此，冷冻鸡蛋比冷冻胚胎更难。究表明，在冷冻和解冻过程中，细胞内部形成的冰晶会破坏纺锤体，导致卵子染色体异常[11]。些异常的可能性也与患者的年龄和冷冻/解冻技术不同[12]。前，许多研究表明，冷冻/解冻的玻璃化蛋具有比冷冻/解冻的慢蛋更高的回收率[13-15]。一步的研究表明，冷冻/解冻的玻璃化蛋比慢速冷冻/解冻速率恢复得更快[16]。
于玻璃化是一种“开放”系统，因此蛋与液氮直接接触并且非常迅速地冷却，从而最小化冰晶的形成。前，有充分的证据表明，对于一些年轻的不孕夫妇，玻璃化/解冻后的受精率和卵子妊娠率与新鲜卵子的受精率和卵子妊娠率没有显着差异。然解冻卵子目前的数据是有限的，他们目前还没有不同于IVF / ICSI传统和关于染色体异常，出生缺陷和发育异常的自然受孕了。11]冷冻蛋的保质期：对冷冻蛋的保质期及其对蛋回收率和妊娠结果的影响研究很少。Parmegiani L等。[17]比较冷冻/解冻间隔较短的鸡蛋的恢复率，受精率，卵裂率，胚胎质量，着床率和活产率和鸡蛋每隔4年。着差异。Rienzi L等[18]对几个中心进行了纵向队列分析，发现受精率，卵裂率，妊娠率和分娩率与新鲜IVF周期相似。冻/解冻鸡蛋。们的研究还表明，ITM卵母细胞的玻璃化/融化是一种相对安全有效的辅助妊娠方法。险：关于冷冻卵锭和染色体异常，Cobo A等。[19]使用荧光原位杂交形成实验组中形成的胚胎和对照组（新鲜周期）（受精后冷冻/解冻的卵）。胎比较显示染色体异常的发生率无显着差异。Noyes N等。[20]还发现，从冷冻卵子出生的900名多名婴幼儿/在美国，尤其是那些出生冷冻卵子解冻/décongelés.L'incidence出生缺陷并不比出生的婴儿的显著较高在美国。
加。岸RC等[21]还比较了体重和200名婴儿先天性畸形的出生在玻璃化165次循环的速率鸡蛋冷冻/与那些出生在周期成本和循环解冻没有发现差异两组之间。果还表明，鸡蛋冷冻/解冻后的怀孕和分娩的后代没有显着增加产科和围产期的风险。研究中6例玻璃化冷冻/解冻卵的数据表明，该技术可以提高受精率和卵裂率，但卵子回收率较低，表明在此过程中蛋玻璃化/解冻，观察蛋形态的变化需要对操作者的经验有更严格和更高的要求。苏后的高级胚胎和胚泡形成率低于新鲜周期循环，表明卵子具有自我修复机制，但由此引起的物理损伤超低温的强烈刺激（透明带的硬化[22]，形成冰晶）。[10]等），由此产生的生理损伤（纺锤解聚，DNA损伤[10]，ATP水平[23]等）仍难以避免。于怀孕的结果，尽管病例数很少，但只有在临床怀孕期间移植的两个胚胎才有高质量的胚胎，这表明如果卵子可以形成高质量的胚胎在超低温下进行冷冻/解冻后，可以预测它们。胎的发育潜力很好，移植后会有很好的效果。此，鸡蛋的玻璃化应该是保持女性生育能力的更有效措施。
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