评估对冷冻猪精液不同品种小管的类型的效果,它提供了冷冻小管在实际生产猪精子冷冻的选择提供了理论依据(长白,约克和杜洛克) 。种7头)精液分为不同的类型的小管(5.00,0.50的,0.25毫升)和不同类型的公猪和不同类型的不同品种的公猪的后种子的质量进行比较。
(精子活力,畸形率和冷冻后的顶体完整性水平)。果表明,在相同的剂型中,精子顶体完整率是冷冻公猪杜洛克(P <0.05)高于长白后显著更高,与分配的例外与管结束0.25毫升,三只公猪在三个指标上。异不显着(p> 0.05)。
高精子3种公猪分别为0.50毫升的细管和异常精子和顶体完整性的最佳剂型中的5.00毫升细管。之,三种类型的细管中,只有0.25毫升剂型有品种效应,而三个品种公猪有剂型基本上类似的效果。式;精液;冷冻保存;剂型;各种分类号:S828文献代码:A文章编号:0439-8114(2014)20-4917-03DOI:10.14088 / j.cnki.issn0439-8114.2014.20.038Effets包类型和品种对精子的冷冻保存sanglierLIU去yu1,2,杨上xue3,黄明广1,李美zhen2,李Xun3潘天biao1,黄广云1,胡传huo3Ab摘要:对评估秸秆类型的影响从不同品种的公猪中冷冻保存精子为选择适合冷冻精子生产实践的秸秆提供了理论参考。种源自美国公猪(长白猪,大约克夏猪和杜洛克猪)的精子是:品种指数从三场比赛和稻草类型冷冻后由精子活力,畸形和顶体完整该结果表明,对于相同类型的秸秆,叔无显著差异(p> 0.05)的三个种族之间发现,与杜洛克公猪acosome 0的完整性的例外,25 mL,显着高于长白猪(P <0.05)。三场比赛,具有最高精子活力包装的类型是0.50毫升秸秆和5.00毫升稻草,异常和顶体的完整性进行了最好的他表明,种族的效果不得不秸秆0.25毫升的类型的效果,它在三个种族到分组类型相似的效果。键词:野猪;精液;冷冻保存;包装类型;比赛。究早期猪肉汤,猪肉精液使用玻璃瓶或玻璃试管和更高浓度的甘油溶液进行冷冻保存的冷冻技术。施加到牛粒干冰的方法应用于猪和甘油溶液浓度降低至1%至3%,并快速冷冻和冷却操作已经进行了[1 ]。后,猪精液冷冻技术使用各种包装方法,其中包括的5.00毫升大细管,各类的5.00毫升铝袋4塑料袋, 00~5.00 ml,1.70至2.00 ml管,0.50 ml管,0.25 ml微管,但冷冻后精子质量不同。前,还没有研究小组系统比较普遍使用的相同的条件下冷冻,以确定最佳的运输工具产品的经销方式,这是选择工具的一个有价值的理论依据。实际冷冻生产中运输。于细管的方法,还有最近开发point.Il冷冻的方法很容易通过细管的方法来存储,并有助于提高sperme.Cette体验使用帐篷率在许多冷冻保存工具中比较小管(5.00,0.50,0.25 mL)的剂型。冻后对猪肉种子质量的影响为冷冻猪肉汽油实际生产中薄管剂型的选择提供了理论依据。料和方法材料试剂和样品的葡萄糖由天津化学试剂Komio有限公司提供,柠檬酸是由国药化学试剂有限公司,羟甲基氨基甲烷(TRIS),N-乙酰半胱氨酸(N-乙酰半胱氨酸提供,NAC),青霉素和链霉素由北京索莱宝科技有限公司提供,甘油是由汕头市西樵化工厂有限公司提供Minitube提供0.25,0.50和5.00 mL的蛋塑料管。鲜精液收集用手从广西科达改进有限公司和美国健康的公猪,性欲旺盛,种族长白,杜洛克和约克夏收集每场比赛7次,收集细胞富含精子。子在一小时内在干净的预热烧杯中送到实验室。滤8层纱布,检查运动性,畸形和精子密度。随后的试验中继续使用活力> 0.7且变形率<20%的精子。
通道电冰箱(海尔组)移液枪(Eppendorf)中,相衬显微镜(Olympus),离心机(科学的植物上海安亭),在恒定温度(出厂长安科学仪器)电子浴,冷却设备程序(IMV卡)公司苏)。法步骤精子 - 解冻冷冻的粗棉布包裹在精液的10层,缓慢冷却至室温,然后在等温稀释剂混合[2](表1)(稀释比例为1:2,C'是说,首先在室温下添加稀释剂的1份,并均匀地混合平衡后15分钟,加入另一个稀释。们已被包装在0.25的塑料管,0, 50和5.00毫升,纱布包裹的10层以上,并在5℃下置于冰箱中4小时。出塑料管,以检查平衡检查活力被放置在的冷却方案仪器(5〜-5℃,3℃/分钟; -5〜-42℃,100℃/分钟; -42℃〜140℃,30℃保持2分钟)和一完成后,取下塑料管并快速将其放入液氮中。除霜时,将管子取出从液氮中取出塑料,并迅速置于37℃的水浴中30至60秒。子冷冻后的质量评估)。5微升的血清是从冷冻干燥的精子提取在载玻片上加入盖玻片后,在相差显微镜观察的视图5个字段和每个视场至少200精子。体的变形率和完整性水平。据Zou等人的方法。[3],将细胞染色并在相差显微镜下观察,两片对各处理制备,并以至少200精子已经每片叶计数。据塑料管容量5.00,0.50,0.25mL,3组进行试验设计,每个品种重复7次。据处理数据表示为平均值±标准差,并用SPSS软件处理。相同剂型的三种制剂之间和相同类型公猪的不同公猪之间的三种指标进行显着差异分析。过三种公猪相同的形式posologique.Le表2精子质量的结果和分析比较显示,精子顶体完整性率为显著升高(P <0.05)高于Changbaigong,至细管分布为0.25 mL。在精子活力无显著差异,变形率和顶体三个公猪之间在相同的剂型(P> 0.05)的完整性。同类型的冷冻后公猪的不同制剂的质量进行比较,表2显示,在冷冻后精子活力,三种公猪是0.50毫升剂量组中最高的,虽然的是,在克制剂和硬的0.25mL的治疗组之间的差异不显著(P> 0.05),但高于5.00 mL组的显著更高(3种公猪)和0.25 mL组(长白野猪)(P <0.05)。于冷冻后精子变形率,该组的5.00毫升长白公猪和杜洛克比组的0.25毫升显著降低(P <0.05)。两个剂型具有与0.50毫升组或约3公猪相比。组之间差异不显着(P> 0.05),三组公猪在5.00 ml组中最低。于冷冻后精子顶体完整性的速率,三个公猪是最高5.00毫升剂量组,而且,作为该剂型降低,顶体完整率降低。高的剂量形式精子sevrage.On后的质量的比较在表2中看到,其具有三种类型的0.50毫升的公猪的和最好的剂型的最强精子剂型异常精子和冷冻速率后的顶体完整性的如下:5.00毫升,并有在相同索引的不同品种(P> 0.05之间没有差异显著)。论目前,更普遍冷冻[4-6]中使用的小管以分离牛精液和后者是从传统的块或小丸型端管类型移动冷冻猪肉精液[7-10],但会经常使用。少有报道比较细管的冷冻效果[11]。
实验比较了精液猪肉的冷冻3个细管常用的(5.00,0.50 0.25毫升),包括精子活力,变形率和速率的影响顶体的完整性,这可能反映了冷冻精子质量的本质。标比较。过后在相同的剂型3种公猪比较精子质量,结果表明,除了分配端管0冷冻后,没有关于精液的速率顶体完整品种效果,25mL,以及冷冻后三种剂型的流动性和变形。
二,稀释方法不同的是:在这个实验中,稀释溶液加入两次精子,但都含有所有稀释度加入甘油。究表明,甘油对精液具有保护作用,并具有一定的毒性作用[14,15]。次,在该试验中使用的指标下蓝色和观察相差显微镜的试染色一致性不同测量进行,用黑色红 - 染色后通过Bwanga研究小组电子显微镜中使用的方法苯胺。后,不同的指标指标也可能是影响测试结果的重要因素。琳琳[16]发现,在颗粒剂,加入0.25ml管和5.00毫升管之间的流动性和精子存活率差异不显著,其对应于该实验的结果(5.00毫升和0.25毫升3公猪)。子活力的差异并不显着)。森[17]得出的结论是精子的能量和的正常功能的活精子的数量之间的关系是,当与正常功能精子的数量达到某一阈值其能量只能保证。径为5.00毫升的长管宽,易于包装,节省时间。管含有1份授精剂量,便于授精。0.25毫升的细管和平均大小为0.50毫升的细管。件的输注剂量通常需要20至10个细管,这不会促进授精和生产的普遍促进。个实验的结果表明,5.00毫升管的末端具有最低的精子畸形率和顶体完整率最高,端管更有利于实际产出率三种剂型中的冷冻汽油。而,对于5.00毫升剂型的冷冻后的精子活力降低的原因,需要进一步的研究,加快商业化应用的步伐。论在本实验的条件下,冷冻后精子的最佳剂量为0.50毫升细管,而冷冻后异常精子和顶体完整性的最佳剂型是5, 00毫升细管。
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