探讨脯氨酸含量的冷冻保存中国杉木胚性愈伤组织的作用，本实验进行了使用愈伤组织年龄14天中国杉并建立在预处理阶段不同脯氨酸含量，使用TTC方法。定相应的细胞活力。果表明，在预处理阶段脯氨酸浓度为05 g·L1时，细胞存活率最高。说在预处理步骤中加入适当浓度的脯氨酸可以提高超低温冷冻保存的存活率。氨酸在冷冻保存中;杉木;胚发生愈伤组织分类号：S722.3 7文献编码：A文章编号：1004-3020（2014）上杉木lanceolataYao DanjingQu一尘JinhuiRésumé愈伤组织冷冻保存脯氨酸的03-0030-03L'influence：探讨脯氨酸的杉木，14天愈伤杉木细胞存活的愈伤组织的冷冻保存的胚发生过程中的作用，通过TTC方法对不同浓度在预处理阶段脯氨酸的测定表明：在预处理阶段，当脯氨酸浓度为0.5 g·L1时，细胞存活率相对较高，表明在预处理阶段加入适当浓度的脯氨酸可以提高存活率细胞。
冻保存。键词：脯氨酸;冷冻保存;杉木（Cunninghamia lanceolata）;胚性愈伤组织。木（Cunninghamia lanceolata）是中国特有的一种快速生长的基础树种，广泛用于木材和医药用途。前，中国使用杉木成熟合子胚的允许体细胞胚[1]，但亚文化经过长时间，体细胞胚胎的能力逐渐下降，直到它失去了什么。
3次。
置于23℃的黑暗中.21小时后，除去上清液，加入5ml蒸馏水洗涤细胞3次。入5 mL 95％乙醇，冷库安装置于60°C水浴中30 min，轻轻摇动1或2次，在室温下静置直至细胞无色。去上清液，用分光光度计在485nm处测量吸光度。
胞活力表示为相对存活率。胞存活率= TTC TTC值解冻的细胞的相对值冷冻细胞数×100个％结果与冷冻保存的超低温下的中国杉木的胚发生愈伤组织的生长状态分析富含水和丰富（图1A）。过18天的预培养，杉木的胚性愈伤组织呈黄色，略微脱水（图1B）。处理4天后，细胞呈黄棕色，渗透压高，受损组织有明显的水分流失，细胞质浓缩，适合冷冻状态（图1C）;高渗透性3天的杉木胚性愈伤组织发育缓慢，未出现新的愈伤组织（图1D）;从27天胚性愈伤组织发育出一种新的愈伤组织（图1E）;一个中国杉木胚发生愈伤组织冷冻后传代培养，并用FIR胚发生愈伤组织解冻此外相比后恢复中的水含量，所述棘突结构较低，愈伤组织细胞是更粘（图1F ）。1：杉木胚性愈伤组织不同阶段的状况A.栽培的杉木胚性炭; B.C 18天预培养的胚性愈伤组织，C。处理杉木4天胚胎发育受损组织; D.胚性杉木愈伤组织3天的高渗透复苏; E.重组27天的F-胚胎愈伤组织;重组杉木的胚性愈伤组织恢复。氨酸浓度对杉木胚性愈伤组织存活率的影响取自预培养的胚性愈伤组织20天和复苏，之后分光光度计在485 nm处的吸光度为测量和验证。算细胞的相对存活率，如图2所示。预处理阶段，添加不同浓度的脯氨酸对杉木胚性愈伤组织的存活率有一定影响。
图2中可以看出，当预处理阶段的脯氨酸浓度为05g·L1时，细胞的存活率相对较高。论目前，有关植物愈伤组织冷冻保存的研究很多，但很少有研究调查脯氨酸对植物愈伤组织冷冻保存的影响。
于所研究的杉木胚性愈伤组织的超低温冷冻保存技术，本实验探索了脯氨酸在其过程中的作用。验在预处理阶段加入不同浓度的脯氨酸，以找到最合适的脯氨酸浓度，使冷冻后的存活率更高。果表明，在预处理阶段脯氨酸浓度为05 g·L1时，细胞存活率最高。外，实验已经表明，预处理的中国冷杉胚性愈伤组织显然是脱水和细胞质高度集中，其在非常低的温度促进冷冻保存并且示出了预处理是在促进的一个重要步骤细胞质浓度。
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