目的:比较不同载体对人卵裂期胚胎玻璃化的影响。法:选择三种类型的培养基,即冰淇淋珠,手工制作的薄片和冷冻环,用于人卵裂期胚胎玻璃化后的移植。较不同组合的恢复率,临床妊娠率和植入率。果:冰珠组的恢复率,妊娠率和植入率均显着低于自制叶组和冷冻环组。
异有统计学意义( p <0.05)。察自制叶片组和冷冻环组的恢复率和妊娠率。和植入率无显着差异(P> 0.05)。论:冷冻载体可以选择自己制作的薄片和冷冻环,以获得满意的冷冻效果。
类解理更好,更经济。;载体;冷冻保护剂;人胚胎处于卵裂期;冷冻玻璃化同时尊重目前的生育能力,冷冻胚胎是唯一成熟的方法。冻胚胎不仅可以保存胚胎资源,还可以提高每个卵子周期的怀孕率。用传统的冷冻方法,玻璃化冷冻具有相对快速,相对便宜的优点。胎的恢复率很高。多[1]。
本文中,选择了三种类型的载体,即冰粒,手工叶和冷冻环,冷库安装用于人胚胎玻璃化后的解冻和复苏,以及不同载体的作用。较人类卵裂期胚胎的冷冻情况,从而选择冷冻的临床携带者。些基线。告如下。
;信息和方法1;一般数据的选择,从2012年9月2013年2月在繁育中心医院佛山儿童体外受精和胚胎移植(IVF-ET)或单精子卵胞浆内注射(ICSI)的患者,移植后剩余的可用胚胎,在取卵后第3天冷冻。390个细胞随机分成三组,每组130个,所选择的胚胎均为I级至II级胚胎。冻保护剂是Onigio玻璃化冷冻试剂盒。冻支持:冰珠:10μl体积,无需特殊准备。制叶子:取一个0.25毫升的传统吸管,用手术剪刀纵向切割,切成两半,将一半的吸管切成2到3毫米。冻环:HR-4-963,由Hamption Research,USA提供。冻方法:将用于Inigio玻璃化的冷冻酰基试剂盒从冰箱升温至20至25℃的室温30分钟,并且所有冷冻步骤在室温下进行。胚胎转移至BS基础溶液中1分钟,然后转移至ES预处理溶液(含有7.5%乙二醇和7.5%二甲基亚砜)3至8分钟。胎细胞为将显微镜带回原始体积,然后转移。衡VS玻璃化30至50秒。用冷冻培养基装载胚胎后,将它们快速置于液氮中冷冻。养基使用方法:冰珠:用微量移液管吸出胚胎和冷冻保护剂处理的溶液,并快速浸入液氮中以控制总体积为10μl。
胎和溶液在液氮中形成少量。球冰起并将它们推入液氮的底部。
无菌镊子取出冰球,然后将它们放入储存管中。制叶片:将冷冻保护剂处理的胚胎轻轻吹入叶子表面,用叶子尖端2至3毫米自制,用吸管控制总体积为1至2微升,然后将环迅速置于液氮中。中间,使用匹配工具将环放置在存储管中。冻环:首先让冷冻环浸泡冷冻溶液,将其取出,粘附在冷冻溶液中,然后用稀释的吸管将冷冻保护剂处理过的胚胎轻轻吹入环中冷冻以控制总体积。1至2μl,然后快速将环浸入液氮中,并使用适当的工具将环放入储存管[2]。胎解冻方法:复苏后,将胚胎从液氮中取出,迅速转移至温度为37.0°C的1.0 mol / L蔗糖在VS1中5秒钟,0.5 mol / L在室温下复苏蔗糖VS2 10秒,0.25 mol / l L SK3蔗糖复苏液20 s,然后转移到蔗糖WS4-1和WS4-2的重新悬浮液中0 ,58mol / L,3分钟,转移到胚胎培养基中进行移植。者的平均年龄为32.4岁。3;统计学方法本文件使用统计分析软件SPSS17.0进行数据统计分析,通过试验2分析,差异有统计学意义,p <0.05。果冰珠组的恢复率,妊娠率和着床率明显低于自制叶组和冷冻环组,差异有统计学意义。
制的叶子由普通麦秸制成,价格低廉,对胚胎无毒害。时,在显微镜下操作比在冷冻环上操作更好。可以放在很多地方,易于操作。
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