研究了冷冻冰和液氮作为冷冻源对精子精子冷冻的影响,包括精子活力和顶体完整性。果表明,精子以干冰冷冻为原因冷冻,精子活力为43.5%,顶体完整性为52.2%,液氮为用作冷冻的冷冻来源。%,顶体完整率为51.5%,冷库安装两者之间的差异不显着。敏;冷冻精液;保鲜效果分类号S828文档标识代码项号0517-6611(2014)11-03280-02Résumé防冻剂干冰和液态氮上frozenthawed精子民猪的影响是研究,包括:精子活力和顶体完整性 - 结果显示干冰精子活力为43.5%和52.2%,精子为41.8%,精子活力为51%,精子5%。护效果目前,人工授精猪肉技术被广泛用于育种,大部分精子都是新鲜精子。交叉感染等问题正在逐渐将人们的注意力转移到冷冻精子上。肉精子本身对冷应力特别敏感,在冷冻过程中容易受损,导致母猪设计率低,产仔数量小,这极大地限制了冷冻精液的应用。此,深入研究猪肉精液的冷冻机理和关键技术的生产,旨在研究影响猪生育和受精效果的因素,进一步提高受孕率。
且垃圾的大小,已成为国内外生猪生产的迫切问题。[1]作为中国当地优质猪肉品种,猪肉具有较高的肥力和肉质,消费者在很大程度上将其考虑在内:研究冷冻猪肉种子技术将大大提高猪肉率使用和养猪的比率。作发展和养猪业的发展具有重要意义。者在精子冷冻过程中使用液氮和干冰作为冷冻源,研究其活性率和顶体完整性,为选择冷冻源提供理论依据。合冷冻精子。料与方法试验设备实验动物。野猪选自黑龙江省农业科学院动物研究所的养猪基地。剂。氮;干冰;使用的试剂是国内分析型。子稀释(基本冻结):碳酸氢钠酸钠0.1g,2.75克葡萄糖,0.29克EDTA,0.69克柠檬酸三钠,三0.56克,加水至100毫升并且混合得很好。
液采集是通过préhension.Il的方法进行仔细porcs.Le精子和皮屑的厚外套的是在sperme.Les公猪精液收集过程前应刷和剪切更严重精子收集。止精子污染[2]。旦精液被收集,精液的稀释以1:1的比率与原精子:1混合,精子和精液的活力与大于70%的生存力控制被选择用于冷冻手术。
结min鱼的种子。
子合格显微镜在17℃下平衡1个小时,然后分装到10毫升离心管中,在800转/分钟在17℃下离心在离心机中10分钟,除去上清液并已达到微观密度。109,预留;在合格精液,冷库安装添加予所述冷冻保护剂溶液中的比例为1:1,平衡在4℃下1小时,显微镜检查,具有70%生存力精液倒入冷冻管0.25 ml,PVA密封粉密封[3],储备。不同的冷冻源冷冻。冰的冷冻方法:使用干冰作为冷源进行精子冷冻。有精子的冷冻管放置约5分钟,雪carbonique.Après的表面上,它被放置在粗棉布袋,然后置于液氮冷冻保存。氮冷冻方法使用液氮作为精子冷冻的冷源。含有精子的冷冻小管悬挂在离液氮表面5cm处,并将液氮熏蒸5分钟,然后放入纱布袋中并置于氮气中。于冷冻保存的液体。冻精子。湿溶液解冻,并将BTS溶液用作解冻溶液。却至42℃后,在解冻后以1000g离心5分钟并重复两次。DPBS和显微镜检查重悬。
精子质量检测。
子的存活率。冻后,用DPBS将精子稀释20倍,在37℃下静置20分钟并混合。子存活率每=(数精子:20微升显微镜在37℃下置于恒温热板上根据使用血细胞计数的方法以下方法计算精子的数目线性运动/精子总数)×100%。体的完整性水平。过考马斯亮蓝G250测量解冻精子的顶体完整性程度。整的顶体可以是蓝色的,并且具有破坏的顶体的精子不能着色。
子顶体完整率=(完整精子精子/总精子数)×100%讨论猪精子冷冻技术主要使用干冰,液氮等。为冷冻的来源,精子的特殊处理,然后超低液氮完全停止细胞的代谢,实现长期保存目标[4],最终精子受损程度由冷却速率和最终冷冻温度决定[5]。者在干冰上使用冷冻方法,用液氮冷冻方法冷冻精子。用干冰作为冷冻源的效果优于液氮在种子活动和解冻后猪顶体完整性方面的效果,但两者之间存在差异。可能是因为液氮的蒸发速度更快,这使得冷冻过程中的温度变化更大,导致对精子的损害大于对干冰造成的损害。
胶来源。体原因仍需要进行额外测试。
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