脐带血造血干细胞的输注和移植用于治疗再生障碍性贫血和白血病,以及放疗和化疗后恶性肿瘤的辅助治疗,引起了人们的极大兴趣。
植的关键,本文使用三种方法从脐带血中分离白血球干细胞,并比较不同方法的分离和冷冻保存的效果。材料和方法收集脐带血采集:在无菌条件下,新生儿结扎的脐带从脐静脉穿刺,脐带血被切除。温保护性Ry:将DMSO缓慢加入到1640溶液中并搅拌以制备含有20%DMSO的1640保护溶液。
胞分离溶液:6%葡聚糖:分子量为200,000至300,000.Distrizoate淋巴细胞聚蔗糖的分离溶液:密度为1,007。离:I:离心。
变暖:40°C水浴快速升温。测:单核细胞计数,台盼蓝拒绝率,GM-CFUC培养。用常规方法进行上述测试。果分离法分离的脐血干细胞的胸苷释放率和有核细胞分离方法冷冻保存后的有核细胞回收率为:90.4±3, 8%(I),90.6±3.3%(II),85.4±3.4%(III)。验表明,Ⅲ组有核细胞的回收率低于Ⅰ组(P <0.05)和Ⅱ组(P <0.05)。
留的额叶泛蛋白排斥率在第一组为98.2±0.8%,第二组为97.9±0.8%,第三组为98.2±0.9%。
GM-CFU-C的恢复率在第一组中为80.5%,冷库安装在第二组中为81.6%,在第三组中为61.2%。Ⅲ组GM-CFU-C的恢复率低于I组和II组(P <0.05)。
讨人们对脐带血中的造血干细胞移植产生了很大的兴趣,冷库安装一些国家也研究了不同条件下造血干细胞的存活。文讨论的三种方法,即I组(离心法),虽然冷冻保存后有核细胞的回收率和GM-CFU-C的回收率较高,但分离的细胞总数是低。III组(淋巴细胞分离)的回收率较低。第II组分离的单核细胞数(沉降法)相对较高,回收率相对较高,使其成为从脐带血中分离造血干细胞的理想方法。
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